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SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA I
siRNA

SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA I #11879

蛋白质印迹法

使用 MDR1/ABCB1 Antibody #12273(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA I (+) 或 SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA II #11906 (+) 的 DLD-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。MDR1/ABCB1 Antibody 确认 MDR1/ABCB1 表达沉默,而 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb 则用作上样对照。

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CST 建议转染 100 nM SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。

存储:

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 MDR1/ABCB1 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试,并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。

MDR1/ABCB1 属于 ATP 结合上样板转运体超家族的 Mdr/Tap 亚家族 (1)。多重耐药 1 (MDR1) 发挥外源化合物外排泵的作用,并具有广泛的底物特异性。MDR1 底物包括治疗药物(如放线菌素 D、依托泊苷、伊马替尼和多柔比星)以及内源性分子(包括 β 淀粉样蛋白、类固醇激素、脂质、磷脂质、胆固醇和细胞因子)(2)。研究表明, MDR1 可减少肿瘤细胞中的药物累积,从而导致产生抗药性 (3-5)。另一方面,MDR1 在血-脑、血-脑脊髓液或血液胎盘屏障细胞质膜中的表达,可限制药物从顶侧或浆膜侧至此类器官中的通透性 (6,7)。MDR1 也在具有排泄功能的正常组织(如小肠、肝脏和肾脏)中表达 (7)。已经在内质网、囊泡和核膜中检测到胞内 MDR1,并且 MDR1 与细胞转运机制相关 (8)。其他已报道的 MDR1 功能包括:病毒抗性、细胞因子的转运 (9,10) 以及周围和中枢神经系统的脂质平衡 (11-13)。

  1. Furuya, K.N. et al. (1997) Cancer Res 57, 3708-16.
  2. Litman, T. et al. (1997) Biochim Biophys Acta 1361, 169-76.
  3. Chen, C.J. et al. (1986) Cell 47, 381-9.
  4. Kartner, N. et al. (1983) Cancer Res 43, 4413-9.
  5. Chen, G. et al. (1997) J Biol Chem 272, 5974-82.
  6. Brinkmann, U. and Eichelbaum, M. (2001) Pharmacogenomics J 1, 59-64.
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  8. Miller, D.S. et al. (2008) Pharmacol Rev 60, 196-209.
  9. Ambudkar, S.V. et al. (1999) Annu Rev Pharmacol Toxicol 39, 361-98.
  10. Raviv, Y. et al. (2000) FASEB J 14, 511-5.
  11. Meijer, O.C. et al. (2003) J Endocrinol 178, 13-8.
  12. Karssen, A.M. et al. (2002) J Endocrinol 175, 251-60.
  13. Jeannesson, E. et al. (2009) Clin Chim Acta 403, 198-202.
Entrez-Gene Id
5243
Swiss-Prot Acc.
P08183
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。

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