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SignalSilence® Chk1 siRNA I
siRNA

SignalSilence® Chk1 siRNA I #6241

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转染 24 小时后,使用 SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 对 HeLa 活细胞进行荧光检测,结果表明具有近 100% 的转染效率。

对转染非靶向 (-) 或靶向 (+) siRNA 的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。Chk1 用 Chk1 Antibody #2345 检测,p42 用 p42 MAPK Antibody #9108 检测。Chk1 Antibody 确认 Chk1 表达沉默,而 p42 MAPK Antibody 则用于 Chk1 siRNA 上样量和特异性对照。

支持数据

反应性 H Mk

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 50 nM Chk1 siRNA 48-72 小时后再进行细胞裂解。

存储:

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology 的 SignalSilence® Chk1 siRNA 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 Chk1 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。所有 SignalSilence® siRNA 产品经严格的内部测试,并且表明可降低特定细胞系中的蛋白表达。

背景

Chk1 激酶在 ATM/ATR 激酶下游发挥作用并且在 DNA 损伤检查点控制、胚胎发育和肿瘤抑制中起着重要作用 (1)。Chk1 的激活需要在 Ser317 和 Ser345 位点由 ATM/ATR 引起的磷酸化,随后在Ser296 发生自磷酸化。该激活会出现以响应 DNA 复制受阻和某些形式的遗传毒性应激 (2)。在检查点激活后 Ser345 位点的磷酸化促使 Chk1 定位至胞核 (3),而Ser317 位点的磷酸化以及 PTEN 的位点特异性磷酸化则使其在 DNA 复制停顿后可以再进入细胞周期 (4)。Chk1 对细胞周期发挥其检查点机制,在某种程度上是通过调控 cdc25 磷酸酶家族发挥的。cdc25A 的 Chk1 磷酸化导引其供蛋白酶解并且通过 14-3-3 结合作用抑制其活性 (5)。激活的 Chk1 可以通过 Ser216 位点的磷酸化使 cdc25C 失活,从而阻断激活 cdc2 及转变成有丝分裂 (6)。据已表明,中心体 Chk1 可使 cdc25B 磷酸化并抑制其激活 CDK1-细胞周期蛋白 B1,从而终止有丝分裂纺锤体的形成和染色质的凝缩 (7)。另外,Chk1 在纺锤体检查点功能中通过调控 aurora B 和 BubR1 而发挥作用 (8)。调查研究表明,Chk1 可作为癌症治疗的药物靶标,这是由于在许多癌细胞系中对 Chk1 的抑制会导致细胞死亡 (9)。

小干扰 RNA (siRNA) 用于使不同人癌细胞系中的 chk1 特异性沉默 (5)。

  1. Liu, Q. et al. (2000) Genes Dev 14, 1448-59.
  2. Zhao, H. and Piwnica-Worms, H. (2001) Mol Cell Biol 21, 4129-39.
  3. Jiang, K. et al. (2003) J Biol Chem 278, 25207-17.
  4. Martin, S.A. and Ouchi, T. (2008) Mol Cancer Ther 7, 2509-16.
  5. Chen, M.S. et al. (2003) Mol Cell Biol 23, 7488-97.
  6. Zeng, Y. et al. (1998) Nature 395, 507-10.
  7. Löffler, H. et al. (2006) Cell Cycle 5, 2543-7.
  8. Zachos, G. et al. (2007) Dev Cell 12, 247-60.
  9. Garber, K. (2005) J Natl Cancer Inst 97, 1026-8.
  10. Chen, Z. et al. (2003) Mol Cancer Ther 2, 543-8.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
限制使用标签许可,RNA 干扰:本产品获得欧洲专利 1144623 和德国库尔姆巴赫 Ribopharma AG 国外同等机构的许可,仅供非商业研究使用,尤其不得用于 (a) 由或代表某个商业实体进行药物发现或开发,包括靶标识别或验证;(b) 合同研究或商业筛选服务;(c) 生产或制造出售用的 siRNA 相关产品,或 (d) 生成商业数据库出售给第三方。有关这些及其他商业用途的许可信息可从 Ribopharma AG, Fritz-Hornschuch-Str. 9, D-95326 Kulmbach, Germany 处获得。

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产品货号 规格 价格 库存
6241S
300 µl (50-100 次转染)

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