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SignalSilence® Bmi1 siRNA I
siRNA

SignalSilence® Bmi1 siRNA I #6442

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使用 Bmi1 (D20B7) XP® Rabbit mAb #6964(上图)或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125(下图),对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) 或 SignalSilence® Bmi1 siRNA I (+) 的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。Bmi1 (D20B7) XP® Rabbit mAb 确认 Bmi1 表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作上样对照。

支持数据

反应性

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 100 nM Bmi1 siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。

存储:

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® Bmi1 siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 Bmi1 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试,并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

质量控制

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。

背景

多梳家族 (PcG) 蛋白有助于细胞身份的维持、干细胞自我更新、细胞周期调节和肿瘤发生,这些功能通过维持一些促进细胞系特异性、细胞死亡和细胞周期停滞的基因的沉默实现 (1-4)。PcG 蛋白存在于两个复合体中,这两个复合体通过表观遗传染色质修饰配合,以维持长期的基因沉默。第一个复合体 EED-EZH2 通过 DNA 结合转录因子被募集到基因上,并在 Lys27 位点甲基化组蛋白 H3。这种组蛋白甲基转移酶活性需要该复合体的 Ezh2、Eed 和 Suz12 亚基 (5)。组蛋白 H3 在 Lys27 位点的甲基化能促进第二个复合体 PRC1 的募集,从而能使组蛋白 H2A 在 Lys119 位点被泛素化 (6)。Bmi1 是 PRC1 复合体的一个组分,能与 Ring1 一起大幅度增强 Ring2 催化亚基的 E3 泛素连接酶活性 (7)。Bmi1 通过抑制 p16 INK4A 和 p19 ARF 基因在调节细胞增殖和衰老中发挥重要作用,并且是维持成体造血和神经干细胞所必需的 (3,4,8-10)。

  1. Boyer, L.A. et al. (2006) Nature 441, 349-53.
  2. Lee, T.I. et al. (2006) Cell 125, 301-13.
  3. Park, I.K. et al. (2003) Nature 423, 302-5.
  4. Molofsky, A.V. et al. (2003) Nature 425, 962-7.
  5. Cao, R. and Zhang, Y. (2004) Mol Cell 15, 57-67.
  6. Wang, H. et al. (2004) Nature 431, 873-8.
  7. Cao, R. et al. (2005) Mol Cell 20, 845-54.
  8. Molofsky, A.V. et al. (2005) Genes Dev 19, 1432-7.
  9. Jacobs, J.J. et al. (1999) Nature 397, 164-8.
  10. Jacobs, J.J. et al. (1999) Genes Dev 13, 2678-90.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。

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