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6512
SignalSilence® Bad siRNA II
siRNA

SignalSilence® Bad siRNA II #6512

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使用 Bad Antibody #9292 和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125 ,对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 (-) 或 SignalSilence® Bad siRNA II (+) 的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。Bad Antibody 确认 Bad 表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用于Bad siRNA 的上样量和特异性对照。

支持数据

反应性

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 100 nM Bad siRNA II 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。

存储:

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® Bad siRNA II 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 Bad 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试,并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

质量控制

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。

背景

Bad 是 Bcl-2 促凋亡家族的一员,它通过转移 Bax 与 Bcl-2 和 Bcl-xL 结合而促进细胞死亡 (1,2)。存活因子(如 IL-3)能够通过激活细胞内信号转导通路,导致 Bad 在 Ser112 和 Ser136 位点被磷酸化,进而抑制 Bad 的凋亡活性 (2)。在这些位点的磷酸化会促进 Bad 与 14-3-3 蛋白结合,从而阻止 Bad 与 Bcl-2 和 Bcl-xl 的结合 (2)。Akt 在 Ser136 位点磷酸化 Bad 可促进细胞存活 (3,4)。Bad 在体内体外都能够被 p90RSK (5,6) 和线粒体锚定 PKA 在 Ser112 位点磷酸化 (7)。PKA 对 BH3 结构域 Ser155 位点的磷酸化在阻止 Bad 和 Bcl-xL 的二聚化过程中发挥重要作用 (8-10)。

  1. Yang, E. et al. (1995) Cell 80, 285-291.
  2. Zha, J. et al. (1996) Cell 87, 619-28.
  3. Datta, S.R. et al. (1997) Cell 91, 231-241.
  4. Peso, L. et al. (1997) Science 278, 687-689.
  5. Bonni, A. et al. (1999) Science 286, 1358-1362.
  6. Tan, Y. et al. (1999) J. Biol. Chem. 274, 34859-34867.
  7. Harada, H. et al. (1999) Mol. Cell 3, 413-422.
  8. Tan, Y. et al. (2000) J. Biol. Chem. 275, 25865-25869.
  9. Lizcano, J. et al. (2000) Biochem. J. 349, 547-557.
  10. Datta, S. et al. (2000) Mol. Cell 6, 41-51.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
限制使用标签许可,RNA 干扰:本产品获得欧洲专利 1144623 和德国库尔姆巴赫 Ribopharma AG 国外同等机构的许可,仅供非商业研究使用,尤其不得用于 (a) 由或代表某个商业实体进行药物发现或开发,包括靶标识别或验证;(b) 合同研究或商业筛选服务;(c) 生产或制造出售用的 siRNA 相关产品,或 (d) 生成商业数据库出售给第三方。有关这些及其他商业用途的许可信息可从 Ribopharma AG, Fritz-Hornschuch-Str. 9, D-95326 Kulmbach, Germany 处获得。

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