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SignalSilence® ATR siRNA I
siRNA

SignalSilence® ATR siRNA I #6288

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使用 Phospho-(Ser/Thr) ATM/ATR Substrate (4F7) Rabbit mAb #2909(上图)或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125(下图),对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) 或 SignalSilence® ATR siRNA I (+) 且经紫外线处理的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。Phospho-(Ser/Thr) ATM/ATR Substrate (4F7) Rabbit mAb 确认 ATR 激酶活性减弱,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作上样对照。

使用 ATR Antibody #2790(上图)或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125(下图),对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® ATR siRNA I (+) 或 SignalSilence® ATR siRNA II #6289 (+) 的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。ATR Antibody 确认 ATR 表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作上样对照。

支持数据

反应性 H

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 100 nM ATR siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。

存储:

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® ATR siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 ATR 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试,并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

质量控制

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。

背景

毛细血管扩张性共济失调突变激酶 (ATM) 和毛细血管扩张性共济失调 Rad3 相关激酶 (ATR) 属于 PI3 激酶相关激酶 (PIKK) 的家族成员,PIKK 可对后接一个谷氨酰胺的丝氨酸或苏氨酸残基上多个底物进行磷酸化,作为对 DNA 损伤或复制受阻的反应 (1-3)。ATR 在细胞周期信号转导和 DNA 修复过程中发挥重要作用,但除此之外,对于其活性我们了解的很少。ATR 一直以来被认为是在细胞持续激活的状态下出现,并且通过募集 ATR 至单链 DNA 和复制应激位点来促使发生由 DNA 损伤诱发的信号转导。Serine 位点的 ATR 磷酸化 428 是对紫外线诱导的 DNA 损伤的反应, 同时也被认为是激活 ATR 的一种方式 (4,5)。最近的研究显示 ATR 在苏氨酸位点出现自磷酸化1989。与 ATM Ser1981 相似, ATR Thr1989 位点发生磷酸化是对 DNA 损伤的反应,这也表明该位点的磷酸化在 ATR 介导的信号转导中有重要作用 (6,7)。

  1. Kastan, M.B. and Lim, D.S. (2000) Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 1, 179-186.
  2. Abraham, R.T. DNA Repair (Amst) 3, 883-887.
  3. Shechter, D. et al. DNA Repair (Amst) 3, 901-908.
  4. Vauzour, D. et al. (2007) Arch Biochem Biophys 468, 159-66.
  5. Smith, J. et al. (2010) Adv Cancer Res 108, 73-112.
  6. Nam, E.A. et al. (2011) J Biol Chem 286, 28707-14.
  7. Liu, S. et al. (2011) Mol Cell 43, 192-202.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。

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