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11968
SignalSilence® ADAM9 siRNA I
siRNA

SignalSilence® ADAM9 siRNA I #11968

蛋白质印迹法

使用 ADAM9 (D64B5) Rabbit mAb #4151(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® ADAM9 siRNA I (+) 或 SignalSilence® ADAM9 siRNA II #12085 (+) 的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。ADAM9 (D64B5) Rabbit mAb 确认 ADAM9 表达沉默,而 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb 则用作上样对照。

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CST 建议转染 100 nM SignalSilence® ADAM9 siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。

存储:

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® ADAM9 siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 ADAM9 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试,并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。

多结构域膜蛋白的 ADAM(A 解聚素和 A 金属蛋白酶)家族通过脱落细胞表面蛋白(比如细胞因子、生长因子)或者通过影响细胞黏附到细胞外基质(ECM)或直接重构 ECM 的方式影响细胞信号转导和黏附。ADAM 家族成员的保守结构域包括一个前结构域、一个有锌依赖性金属蛋白酶结构域、一个解聚素结构域、一个富含半胱氨酸的结构域、一个 EGF 类序列和一个短胞质尾 (1,2)。

前结构域被认为可辅助蛋白质折叠。解聚素和富含半胱氨酸的结构域在某种程度上可通过结合整合素来介导细胞的黏附。胞质尾磷酸化以及它与其他信号转导蛋白的相互作用可能影响胞内和胞外信号转导 (1)。ADAM9 分布广泛,并被证明可影响皮肤角质细胞内的细胞迁移 (3,4)。研究表明,ADAM9 在前列腺癌 (5)、胰腺癌 (6)、胃癌 (7) 中过表达,并与小细胞肺癌内癌细胞的侵袭和转移有关 (8)。研究还表明,含有蛋白酶活性的选择性剪切 (50 kDa) 形式的 ADAM9 与肿瘤细胞侵袭有关 (9)。

  1. N. M. Hooper and U. Lendeckel. . The Netherlands: Springer, 2005
  2. Schlöndorff, J. and Blobel, C.P. (1999) J Cell Sci 112 ( Pt 21), 3603-17.
  3. Franzke, C.W. et al. (2002) EMBO J 21, 5026-35.
  4. Zigrino, P. et al. (2007) J Biol Chem 282, 30785-93.
  5. Fritzsche, F.R. et al. (2008) Eur Urol 54, 1097-106.
  6. Grützmann, R. et al. (2004) Br J Cancer 90, 1053-8.
  7. Carl-McGrath, S. et al. (2005) Int J Oncol 26, 17-24.
  8. Shintani, Y. et al. (2004) Cancer Res 64, 4190-6.
  9. Mazzocca, A. et al. (2005) Cancer Res 65, 4728-38.
Entrez-Gene Id
8754
Swiss-Prot Acc.
Q13443
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。

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