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5562
PTMScan® Ubiquitin Remnant Motif (K-ε-GG) Kit
蛋白质组分析产品

PTMScan® Ubiquitin Remnant Motif (K-ε-GG) Kit #5562

引用 (38)

在使用泛素残余基序抗体进行的 PTMScan® 研究中,使用所有泛素残余肽完成基序分析。未经处理或已经 MG132 处理的 HCT116 细胞的细胞胰蛋白酶肽使用泛素残余基序抗体 K-ε-GG 进行免疫沉淀,并通过 OrbiTrap MS 进行分析。研究会产生 599 个非重复位点。该基序标识显示,K-ε-GG antibody 是一种可识别 K-ε-GG 基序的常规基序抗体,不会优先检测其他氨基酸。

产品包括 盖颜色 容量(计数)
PTMScan® Ubiquitin Branch Motif (K-ε-GG) Immunoaffinity Beads 蓝色 10 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 白色 10 x 600 µl
PTMScan® Limited Use License 1 x 1 次

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

存储:

抗体微珠以含 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。请不要分装抗体。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,对这些修饰位点发生于何处不会具有偏好性 (1)。如需了解更多有关 PTMScan® 蛋白质组服务的信息,请访问 www.cellsignal.com/common/content/content.jsp?id=ptmscan-services

背景

泛素是一个保守的多肽单位,在泛素-蛋白酶体通路中发挥重要作用。泛素可通过泛素化过程共价连接许多细胞蛋白,在这个过程中,26S 蛋白酶体降解靶标蛋白。三种组分与靶标蛋白-泛素接合过程有关。首先,泛素通过与激活组分 E1 形成硫酯复合体而被激活;激活的泛素继而被转运到泛素载体蛋白 E2,然后从 E2 被转运到泛素连接酶 E3,最后从 E3 被转运到靶标蛋白赖氨酸残基的 ε-NH2 (2-4)。泛素-蛋白酶体通路与各种正常生物过程和疾病相关异常有关。IκB、p53、cdc25a 和 bcl-2 等多种蛋白经证实是泛素-蛋白酶体过程的靶标,可参与调控细胞周期进程、分化、细胞应激反应和凋亡 (5-8)。

在该检测中,PTMScan® Ubiquitin Remnant Motif (K-ε-GG) Antibody Bead Conjugate 是一种专有泛素分支 (“K-ε-GG”) 抗体,它在胰蛋白酶消化后对蛋白底物上残留的泛素残基二甘氨酸标签具有特异性,可用于使胰蛋白酶消化细胞样品中的泛素化肽达到富集。富集后,经 LC-MS/MS 分析可识别上百个到上千个非重复泛素化序列的定量情况。

  1. Ciechanover, A. (1998) EMBO J. 17, 7151-7160.
  2. Hochstrasser, M. (2000) Nat Cell Biol 2, E153-7.
  3. Hochstrasser, M. (2000) Science 289, 563-4.
  4. Bernardi, R. et al. (2000) Oncogene 19, 2447-2454.
  5. Aberle, H. et al. (1997) EMBO J 16, 3797-804.
  6. Salomoni, P. and Pandolfi, P.P. (2002) Nat Cell Biol 4, E152-3.
  7. Rush, J. et al. (2005) Nat Biotechnol 23, 94-101.
  8. Jesenberger, V. and Jentsch, S. (2002) Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 3, 112-121.

产品引用:38

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。

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