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56296
PTMScan® Trypsin, TPCK-Treated
蛋白质组分析产品

PTMScan® Trypsin, TPCK-Treated #56296

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产品使用信息

按照 Cell Signaling Technology 获专利的 PTMScan® 实验步骤,PTMScan® Trypsin-TPCK 可用于初始蛋白消化步骤。在添加胰蛋白酶之前,需将尿素裂解缓冲液中的样品稀释,直至尿素含量为 2M 或更少。如需 1 mg/mL 溶液,则在使用前在 4 mL 1 mM HCl 中溶解 20 mg 胰蛋白酶。转移 4 mL 到 50 mL 锥形试管,并加入 1 mM HCl 让体积达到 20 mL。分装并保存在 -80ºC 下。请参阅具体的 PTMScan® 试剂盒和实验步骤,了解有关在任何蛋白样品消化前要添加的相应蛋白酶的更多详情。

存储:

将冻干的胰蛋白酶粉保存在 4ºC 下,防潮。如需一旦重新配制,则将胰蛋白酶溶液保存在 -80ºC 下。冻干的胰蛋白酶在 4ºC 下的保质期为 1 年,并且其溶液在 -80ºC 下可保持稳定 6 个月。

产品说明

胰蛋白酶是一种在氨基末端 6 氨基酸前导序列被酶去除时,失活胰酶原(胰蛋白酶原)产生的丝氨酸内肽酶。激活的胰蛋白酶会裂解活化赖氨酸和精氨酸的酰胺和酯键,并广泛用于培养皿中细胞的脱离、蛋白测序和蛋白质组应用。

背景

胰蛋白酶会水解未修饰精氨酸和赖氨酸残基的羧基侧,从而酶解多肽 (1)。当裂解活化位点两侧为酸性残基时,蛋白水解较为缓慢,并且如果赖氨酸或精氨酸后接着脯氨酸,则蛋白水解将不会发生 (2-5)。pH 为 8.0 时,胰蛋白酶的活性最佳,并会受到氯磷酸二异丙酯、EDTA、抑肽酶、Ag+ 和苯甲脒等有机磷化合物不同程度的抑制 (6-8)。

  1. Brown, W.E. and Wold, F. (1973) Biochemistry 12, 828-34.
  2. Rodriguez, J. et al. (2008) J Proteome Res 7, 300-5.
  3. Leiros, H.K. et al. (2004) Protein Sci 13, 1056-70.
  4. Rawlings, N.D. and Barrett, A.J. (1994) Methods Enzymol 244, 19-61.
  5. Perona, J.J. and Craik, C.S. (1995) Protein Sci 4, 337-60.
  6. KOSTKA, V. and CARPENTER, F.H. (1964) J Biol Chem 239, 1799-803.
  7. Levilliers, N. et al. (1970) Arch Biochem Biophys 140, 474-83.
  8. Polgár, L. (2005) Cell Mol Life Sci 62, 2161-72.
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标

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