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17848
PTMScan® Propionyl-Lysine [Prop-K] Kit
蛋白质组分析产品

PTMScan® Propionyl-Lysine [Prop-K] Kit #17848

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该图表显示了包含丙酰化赖氨酸残基蛋白的相对类别分布,这种蛋白来源于一项使用 PTMScan® Propionyl-Lysine Immunoaffinity Beads 对小鼠肝脏组织进行的 PTMScan® LC-MS/MS 实验所鉴定的肽。

使用430条非重复胰蛋白酶解肽进行 PTMScan® LC-MS/MS 实验产生了该基序标识,这种酶解 肽来源于经 PTMScan® Propionyl-Lysine [Prop-K] Immunoaffinity Beads 免疫沉淀的小鼠肝脏组织。在该数据组内,标识表示氨基酸出现在中央丙酰化赖氨酸残基周围的每个位点的相对频率。

产品包括 盖颜色 容量(计数)
PTMScan(R) Propionyl-Lysine Immunoaffinity Beads 蓝色 10 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 白色 10 x 600 µl
PTMScan® Limited Use License 1 x 1 次

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif Antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

存储:

抗体微珠以含 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。请不要分装抗体。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,不会对这些修饰位点发生于何处产生任何先入为主的偏见。如需了解更多有关 PTMScan® Proteomics Services 的信息,请访问 www.cellsignal.com/services/index.html。

背景

由于带正电荷的 ε 氨基团侧链,赖氨酸会受各种翻译后修饰的调控。在这些修饰中,最普遍的包括泛素化和乙酰化,这两种修饰在原核细胞和真核细胞中高度保守 (1,2)。从代谢中间产物乙酰-、琥珀酰-、丙二酰-、戊二酰-、丁酰-、丙酰-及巴豆酰-辅酶 A 中转移的酰基均会中和赖氨酸的正电荷,从而引起会影响底物蛋白功能的结构改变。使用乙酰-辅酶 A 作为辅因子时,组蛋白乙酰转移酶 HAT 会催化赖氨酸乙酰化 (3,4)。组蛋白脱乙酰酶 HDAC 1-11 和 NAD 依赖性 Sirtuins 1-7 会介导去乙酰化。某些 sirtuin 有少许或没有脱乙酰酶活性,表明它们更适合其他乙酰化赖氨酸底物 (5)。

报道称,p300 和 CREB 结合蛋白具有蛋白丙酰和丁酰转移酶活性,它们是两种能体外自乙酰化并靶向组蛋白和 p53 的乙酰转移酶。Sirt1(酵母中的 Sir2)经证实具有去丙酰酶活性,并且可能是一种主要的真核细胞去丙酰酶 (6,7)。在胞质中,乙酰辅酶 A 羧化酶 (ACC) 将乙酰化辅酶 A 转化成丙二酰化辅酶 A,丙二酰化辅酶 A 脱羧酶 (MCD) 会催化这种逆反应,但在线粒体中,丙酰化辅酶 A 羧酶则会取代 ACC。AMPK、血糖水平和胰岛素均可调控 MCD 和 ACC,从而强调它们在中间代谢中的重要性 (8)。

  1. Liu, Z. et al. (2014) Nucleic Acids Res 42, D531-6.
  2. Lee, S. (2013) Toxicol Res 29, 81-6.
  3. Lin, H. et al. (2012) ACS Chem Biol 7, 947-60.
  4. Zhang, Z. et al. (2011) Nat Chem Biol 7, 58-63.
  5. Du, J. et al. (2011) Science 334, 806-9.
  6. Chen, Y. et al. (2007) Mol Cell Proteomics 6, 812-9.
  7. Cheng, Z. et al. (2009) Mol Cell Proteomics 8, 45-52.
  8. Newman, J.C. et al. (2012) J Biol Chem 287, 42436-43.
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PhosphoScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。

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