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PTMScan® Pilot Phospho-Tyrosine Rabbit mAb (P-Tyr-1000) Kit
蛋白质组分析产品

PTMScan® Pilot Phospho-Tyrosine Rabbit mAb (P-Tyr-1000) Kit #14478

引用 (29)

2362 条磷酸化酪氨酸胰蛋白酶肽的代表性基序分析,其中这种酶肽来源于一项使用 PTMScan® Phospho-Tyrosine Motif (Y*) (P-Tyr-1000) Immunoaffinity Beads 对已经 Calyculin A #9902 和过钒酸钠处理的 Jurkat 细胞进行的 PhosphoScan® 实验所产生。使用 PhosphoSitePlus® Logo Generator 可产生基序标识,该标识反映了残基出现在每个位点的相对频率。如需了解更多信息,请访问 PhosphoSitePlus®,地址为 www.phosphosite.org。

对一项使用 PTMScan® Phospho-Tyrosine Motif (Y*) (P-Tyr-1000) Immunoaffinity Beads 对小鼠脑和小鼠肝胰蛋白酶肽进行 PhosphoScan® 实验所产生的所有酪氨酸磷酸肽完成基序分析。对 1178 个非重复位点绘制的基序标识显示了使用 Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) Rabbit mAb #8954 识别的位点周围的氨基酸分布。基序标识表明,该抗体是一种常规磷酸化酪氨酸抗体,不会优先检测在其他位点的氨基酸。

产品包括 盖颜色 容量(计数)
PTMScan® Phospho-Tyrosine Motif (Y*) (P-Tyr-1000) Immunoaffinity Beads 蓝色 3 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 白色 3 x 600 µl
PTMScan® Trypsin Digested Control Peptides I 12219 蓝色 1 x 1 小瓶
PTMScan® Limited Use License 1 x 1 次

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif Antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

PTMScan® Trypsin Digested Control Peptides I 以冻干粉形式保存。对含有冻干肽的试管进行离心分离,以便采集要溶解的所有物质。添加 1.4 ml PTMScan® IAP Buffer (1X),并对整个小瓶中重新配制的肽执行免疫亲和纯化 (IAP) 步骤中的 PTMScan® 试剂盒实验步骤。

存储:

抗体微珠以含有 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。请不要分装抗体。冻干肽保存在 -20°C 下。冻干形式的肽可保持稳定 24 个月。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,对这些修饰位点发生于何处不会具有偏好性 (1)。如需了解更多有关 PTMScan® 蛋白质组服务的信息,请访问 www.cellsignal.com/services/index.html

背景

通过结合 LC-MS/MS,PhosphoScan® 技术采用 phospho-residue (Tyr, Ser, Thr) motif antibodies 来对细胞提取物进行磷酸肽免疫亲和纯化,从而检测和定量分析磷酸化水平的变化 (1)。酪氨酸磷酸化在细胞信号转导中起关键作用。研究表明,在癌细胞中,未调节的酪氨酸激酶活性可通过产生不正常的增殖和存活信号来促成恶性疾病和肿瘤的形成 (2)。在这些研究中,对磷酸酪氨酸有特异性的抗体是有价值的试剂 (3,4)。Cell Signaling Technology 开发的 Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) Rabbit mAb #8954 可用作一种极其灵敏的工具在高通量药物发现中研究酪氨酸磷酸化并检测酪氨酸激酶活性。PTMScan® (Y*) Motif Antibody 微珠接合物用于使包含*Y 基序(Y* = 磷酸化酪氨酸)的磷酸肽达到特异性富集。

  1. Schlessinger, J. (2000) Cell 103, 211-25.
  2. Blume-Jensen, P. and Hunter, T. (2001) Nature 411, 355-65.
  3. Ward, S.G. et al. (1992) J Biol Chem 267, 23862-9.
  4. Rush, J. et al. (2005) Nat Biotechnol 23, 94-101.

产品引用:29

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PhosphoScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。

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