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14499
PTMScan® Pilot Acetyl-Lysine Motif [Ac-K] Kit
蛋白质组分析产品

PTMScan® Pilot Acetyl-Lysine Motif [Ac-K] Kit #14499

引用 (1)

该图表显示了包含乙酰化赖氨酸残基蛋白的相关分类分布,这种残基源于一项使用 PTMScan® Acetyl-Lysine Motif [Ac-K] Immunoaffinity Beads 对小鼠肝组织进行的 AcetylScan® LC-MS/MS 实验制备的肽。

使用2549 条非重复胰蛋白酶肽进行 AcetylScan® LC-MS/MS 实验可产生基序标识,这种肽来源于经 PTMScan® Acetyl-Lysine Motif [Ac-K] Immunoaffinity Beads 免疫沉淀的小鼠肝组织。在该数据组内,该标识表示氨基酸出现在中央乙酰化赖氨酸残基周围的每个位点的相对频率。

产品包括 盖颜色 容量(计数)
PTMScan® Acetyl-Lysine Motif [Ac-K] Immunoaffinity Beads 蓝色 3 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 白色 3 x 600 µl
PTMScan® Trypsin Digested Control Peptides I 12219 蓝色 1 x 1 小瓶
PTMScan® Limited Use License 1 x 1 次

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif Antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

PTMScan® Trypsin Digested Control Peptides I 以冻干粉形式保存。对含有冻干肽的试管进行离心分离,以便采集要溶解的所有物质。添加 1.4 ml PTMScan® IAP Buffer (1X),并对整个小瓶中重新配制的肽执行免疫亲和纯化 (IAP) 步骤中的 PTMScan® 试剂盒实验步骤。

存储:

抗体微珠以含有 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。切勿分装抗体。冻干肽保存在 -20°C 下。冻干形式的肽可保持稳定 24 个月。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,对这些修饰位点发生于何处不会具有偏好性 (1)。如需了解更多有关 PTMScan® 蛋白质组服务的信息,请访问 www.cellsignal.com/services/index.html

背景

赖氨酸的乙酰化如同丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的磷酸化一样,是一种控制蛋白活性的重要可逆手段。四个核心组蛋白 (H2A、H2B、H3、H4) 的保守氨基末端区域均包含赖氨酸,可以被组蛋白乙酰转移酶 (HAT) 乙酰化和组蛋白去乙酰酶 (HDAC) 去乙酰化 (1)。组蛋白、转录因子和其它蛋白的乙酰化/去乙酰化信号转导最终影响多个细胞过程,包括染色质结构、基因活性、细胞生长、分化和凋亡等 (2-6)。最近的蛋白质组学研究显示,赖氨酸残基的乙酰化是蛋白翻译后修饰的广泛而重要形式,可以影响控制细胞周期、代谢、生存、肌动蛋白聚合和核转运相关的数千种蛋白 (7,8)。在癌症和多聚谷氨酰胺疾病中,出现蛋白质乙酰化状态调节障碍 (9),并且 HDAC 也有希望成为目前正在开发的抗癌药物靶标 (10)。

  1. Hassig, C.A. and Schreiber, S.L. (1997) Curr Opin Chem Biol 1, 300-8.
  2. Allfrey, V.G. et al. (1964) Proc Natl Acad Sci USA 51, 786-94.
  3. Liu, L. et al. (1999) Mol Cell Biol 19, 1202-9.
  4. Boyes, J. et al. (1998) Nature 396, 594-8.
  5. Polevoda, B. and Sherman, F. (2002) Genome Biol 3, reviews 0006.
  6. Yoshida, M. et al. (2003) Prog Cell Cycle Res 5, 269-78.
  7. Kim, S.C. et al. (2006) Mol Cell 23, 607-18.
  8. Choudhary, C. et al. (2009) Science 325, 834-40.
  9. Hughes, R.E. (2002) Curr Biol 12, R141-3.
  10. Vigushin, D.M. and Coombes, R.C. (2004) Curr Cancer Drug Targets 4, 205-18.
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PhosphoScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PhosphoSitePlus 是 Cell Signaling Technology,Inc.的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。

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