数千种兔单抗立减30% | 点击此处 >>
5566
PTMScan® Phospho-ST*P Motif (ST*P) XP® Rabbit mAb Kit
蛋白质组分析产品

PTMScan® Phospho-ST*P Motif (ST*P) XP® Rabbit mAb Kit #5566

引用 (1)

图表显示了在使用 PLK binding motif antibody 进行的 PTMScan® 研究和 OrbiTrap MS 分析中发现的基本序列基序的比例。分析未经处理和已经 诺考达唑 处理的 HeLa 细胞的肽可获得包含 PLK 结合和相关基序的 452 个非重复位点。主要基序用白色突出显示,98% 的位点为 ST*P 基序;仅 2% 的位点来源于其他包含磷酸化 Ser/Thr 且不含该基序的肽,表明该抗体对 ST*P 基序具有较高的特异性。

基序标识显示抗体检测的位点周围的氨基酸分布。

产品包括 盖颜色 容量(计数)
PTMScan® Phospho-PLK Binding Motif (ST*P) Immunoaffinity Beads 蓝色 10 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 白色 10 x 600 µl
PTMScan® Limited Use License 1 x 1 次

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

存储:

抗体微珠以含 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。请不要分装抗体。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,对这些修饰位点发生于何处不会具有偏好性 (1)。如需了解更多有关 PTMScan® 蛋白质组服务的信息,请访问 www.cellsignal.com/common/content/content.jsp?id=ptmscan-services

背景

ST*P 基序与 polo 样激酶 (PLK) 信号转导有关。这些 Ser/Thr 蛋白激酶在细胞周期期间发挥重要作用。在哺乳动物细胞中至少存在四种 PLK:PLK1、PLK2、PLK3 和 PLK4 (2)。PLK 有一个高度保守的氨基末端激酶结构域和一个相对不同的羧基末端结构域(称为 Polo 盒结构域 (PBD))。在四种 PLK 中,PLK1 的特征最为明显 (3)。PLK1 通过磷酸化中心体、着丝粒、有丝分裂纺锤体和中间体上的底物蛋白来作为有丝分裂活动的一个关键调节分子发挥作用,并且对正常进入有丝分裂的多个阶段非常关键 (4-6)。

PLK1 的 PBD 是一个磷酸化 Ser/Thr 结合分子,最适合检测序列基序 S[S*/T*][P/X](PLK1 结合基序)(6)。PLK1 的 PBD 结合包含 S[S*/T*][P/X] 基序的磷酸肽会解除对激酶活性的抑制功能 (7)。周期素依赖性激酶 (CDK) 等脯氨酸定向激酶会磷酸化 S[S*/T*]P 肽 (6)。这些发现表明,其他有丝分裂激酶(如 CDK)对底物或锚定蛋白的引导性磷酸化可靶向 PLK1 到其底物,同时激活其激酶结构域。该试剂盒中包含的 ST*P Motif (ST*P) XP® Rabbit mAb 可结合 ST*P,被 Cell Signaling Technology 开发来用作研究 PLK1 结合蛋白和 PLK1 底物的一种有用工具。

在该检测中,PTMScan® (ST*P) Motif Antibody 微珠接合物用于使包含 ST*P 基序(T* = 磷酸化苏氨酸)的磷酸肽达到特异性富集。

  1. Nigg, E.A. (1998) Curr Opin Cell Biol 10, 776-83.
  2. Donaldson, M.M. et al. (2001) J Cell Sci 114, 2357-8.
  3. Barr, F.A. et al. (2004) Nat Rev Mol Cell Biol 5, 429-40.
  4. Kishi, K. et al. (2009) Mol Cell Biol 29, 3134-50.
  5. Elia, A.E. et al. (2003) Science 299, 1228-31.
  6. Elia, A.E. et al. (2003) Cell 115, 83-95.
  7. Rush, J. et al. (2005) Nat Biotechnol 23, 94-101.
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
XP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。

Powered By OneLink