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71652
PTMScan® Phospho-PKC Substrate Motif [(R/K)(R/K)Xp(S/T)X(R/X)] Kit
蛋白质组分析产品

PTMScan® Phospho-PKC Substrate Motif [(R/K)(R/K)Xp(S/T)X(R/X)] Kit #71652

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该图表显示了使用431条非重复Lys-C 消化的肽在PhosphoScan® LC-MS/MS 实验中的基本基序分布,这种消化肽来源于小鼠胚胎细胞且用 PTMScan® Phospho-PKC Substrate Motif [(R/K)(R/K)Xp(S/T)X(R/X)] Immunoaffinity Beads 进行免疫沉淀。包含磷酸化苏氨酸的肽占 30% 的数据组,而包含磷酸化丝氨酸的肽则占 70%。

该基序标识是由使用Lys-C 消化肽在PhosphoScan® LC-MS/MS 实验中检测到的 431 一种独特的肽而产生,这种消化肽来源于小鼠胚胎细胞且用 PTMScan® Phospho-PKC Substrate Motif [(R/K)(R/K)Xp(S/T)X(R/X)] Immunoaffinity Beads 进行免疫沉淀。该标识表示氨基酸出现在中央磷酸化残基周围的每个位点的相对频率。

产品包括 盖颜色 容量(计数)
PTMScan® Phospho-PKC Substrate Motif [(R/K)(R/K)X(S/T)X(R/X)] Immunoaffinity Beads 蓝色 10 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 白色 10 x 600 µl
PTMScan® Limited Use License 1 x 1 次

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif Antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

存储:

抗体微珠以含 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。不要分装抗体。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,不会对这些修饰位点发生于何处产生任何先入为主的偏见。如需了解更多有关 PTMScan® Proteomics Services 的信息,请访问 https://www.cellsignal.com/services/index.html。

背景

蛋白激酶 C (PKC) 家族成员与分泌、基因表达、增殖和肌肉收缩等许多信号转导进程有关,但许多 PKC 底物仍未被发现 (1,2)。PKC 同工酶分为常见 PKC (cPKC)、新型 PKC (nPKC) 和非典型 PKC (aPKC)。PKCα、βI、βII 和 γ 同工型属于 cPKC 亚家族 (1)。被激活时,cPKC 同工酶磷酸化包含 Ser 或 Thr 的底物,其中在 -3、-2 和 +2 位点有 Arg 或 Lys,在 + 1 位点有疏水性氨基酸 (1-3)。

  1. Pearson, R.B. and Kemp, B.E. (1991) Methods Enzymol 200, 62-81.
  2. Obata, T. et al. (2000) J Biol Chem 275, 36108-15.
  3. Nishikawa, K. et al. (1997) J Biol Chem 272, 952-60.
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PhosphoScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。

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