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4652
PTMScan® Phospho-MAPK/CDK Substrate Motif (PXS*P and S*PXK/R) Kit
蛋白质组分析产品

PTMScan® Phospho-MAPK/CDK Substrate Motif (PXS*P and S*PXK/R) Kit #4652

引用 (2)

图表显示了在使用 MAPK/CDK substrate motif antibody 进行的 PTMScan® 研究和 OrbiTrap MS 分析中发现的基本序列基序的比例。分析未经处理(实验 #10684)和已经 诺考达唑(实验 #10685)处理的 HeLa 细胞的肽可获得包含 MAPK/CDK 底物和相关基序的 439 个非重复位点。20% 的位点为基序 PXS*PX(R/K);70% 为基序 PXS*P;10% 为基序 S*PX(R/K)。该抗体对磷酸化丝氨酸具有特异性,并且不能识别磷酸化苏氨酸肽。

基序标识显示抗体检测的位点周围的氨基酸分布。

产品包括 盖颜色 容量(计数)
PTMScan® Phospho-MAPK/CDK Substrate Motif (PXS*P, S*PXK/R) Immunoaffinity Beads 蓝色 10 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 白色 10 x 600 µl
PTMScan® Limited Use License 1 x 1 次

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

存储:

抗体微珠以含 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。请不要分装抗体。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,对这些修饰位点发生于何处不会具有偏好性 (1)。如需了解更多有关 PTMScan® 蛋白质组服务的信息,请访问 www.cellsignal.com/common/content/content.jsp?id=ptmscan-services

背景

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的 MAPK 和 CDK 家族在增殖和细胞周期控制方面起着重要作用。这些激酶会磷酸化后跟脯氨酸残基的苏氨酸或丝氨酸 (2-4)。MAPK 会磷酸化含有共同序列 PX(S/T)P 的底物,而 CDK 则会磷酸化包含共同序列 (S/T)PXK/R 的底物。

该试剂盒中包含的 Phospho-MAPK/CDK Substrates (PXSP or SPXR/K) Rabbit mAb #2325 被 CST 开发用来研究和发现新 MAPK 和 CDK 底物 (5,6)。

在该检测中,PTMScan® (PXS*P or S*PXK/R) Motif Antibody 微珠接合物用于使包含 PXS*P 基序或 S*PXK/R 基序(S* = 磷酸化丝氨酸)的磷酸肽达到特异性富集。

  1. Nalepa, G. et al. (2013) J Cell Biol 201, 997-1012.
  2. Cross, T.G. et al. (2000) Exp Cell Res 256, 34-41.
  3. Reynolds, C.H. et al. (2000) J Neurochem 74, 1587-95.
  4. Seger, R. and Krebs, E.G. (1995) FASEB J 9, 726-35.
  5. Songyang, Z. et al. (1996) Mol Cell Biol 16, 6486-93.
  6. Holmes, J.K. and Solomon, M.J. (1996) J Biol Chem 271, 25240-6.
  7. Rush, J. et al. (2005) Nat Biotechnol 23, 94-101.
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。

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