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5564
PTMScan® Phospho-AMPK Substrate Motif (LXRXXS*/T*) Kit
蛋白质组分析产品

PTMScan® Phospho-AMPK Substrate Motif (LXRXXS*/T*) Kit #5564

Citations (1)

图表显示了在使用 AMPK substrate antibody 进行的 PTMScan® 研究和 Orbitrap LC-MS 分析中发现的基本序列基序的比例。分析 H1650 细胞的肽可获得包含 AMPK 底物和相关基序的 187 个非重复位点。主要基序用白色突出显示。83% 位点包含磷酸化丝氨酸,在 -5 位点的亮氨酸或蛋氨酸残基以及在 -3 位点的精氨酸(AMPK 底物基序)的比例为 41%。虽然该抗体优先检测 AMPK 底物基序,但它还可识别在 -3 位点有精氨酸残基的肽。

基序标识显示抗体检测的位点周围的氨基酸分布。

产品包括 盖颜色 容量(计数)
PTMScan® Phospho-AMPK Substrate Motif (LXRXXS*/T*) Immunoaffinity Beads 蓝色 10 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 白色 10 x 600 µl
PTMScan® Limited Use License 1 x  许可

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

存储:

抗体微珠以含 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。请不要分装抗体。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,对这些修饰位点发生于何处不会具有偏好性 (1)。如需了解更多有关 PTMScan® 蛋白质组服务的信息,请访问 www.cellsignal.com/common/content/content.jsp?id=ptmscan-services

背景

AMP 激活的蛋白激酶 (AMPK) 在酵母、植物和动物中都高度保守,并在调节能量平衡方面起关键作用 (2)。在细胞和环境应激(如热休克、缺氧和缺血)下,AMP/ATP 比值升高会激活激酶 (2)。已确定了一些 AMPKγ 亚基的突变,其中大部分位于假定的 AMP/ ATP 结合位点(CBS 或Bateman域)。这些位点的突变导致 AMPK 活性降低,引起心脏或骨骼肌糖原积累 (2,3)。越来越多的证据表明,AMPK 不仅能调节脂肪酸和糖原的代谢,还能通过 EF2 和 TSC2/mTOR 通路调节蛋白质合成和细胞生长,同时还通过 eNOS/nNOS 调节血流 (2)。

该试剂盒包含的 AMPK Substrate Motif (LXRXXS */T*) Rabbit mAb 结合 AMPK 磷酸化基序 LXRXXS*/T* (4),由CST 开发用于研究和发现新 AMPK 底物。

在该检测中,PTMScan® (LXRXXS*/T*) Motif Antibody 微珠接合物用于使包含 (LXRXXS*/T*) 基序(S*= 磷酸化丝氨酸,T*= 磷酸化苏氨酸)的磷酸肽达到特异性富集。

  1. Hardie, D.G. (2004) J Cell Sci 117, 5479-87.
  2. Carling, D. (2004) Trends Biochem Sci 29, 18-24.
  3. Gwinn, D.M. et al. (2008) Mol Cell 30, 214-26.
  4. Rush, J. et al. (2005) Nat Biotechnol 23, 94-101.
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。

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