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8359
ULK1 Antibody Sampler Kit
一抗

ULK1 Antibody Sampler Kit #8359

 图像 1

使用 Phospho-Raptor (Ser792) Antibody #2083(上图和左下图)或 Raptor (24C12) Rabbit mAb #2280(上图和右下图)对未处理 (-) 或已经过 AICAR(0.5 mM,30 分钟)或 Oligomycin #9996(0.5 μM,30分钟)处理 (+) 的 C2C12 或 293 细胞进行蛋白质印迹分析。200 kDa 的交叉反应条带*。

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免疫印迹法图像 2

使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb(上)或 AMPKα Antibody #2532(下),对未经处理或经寡霉素处理 (0.5 µM) 的 C2C12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 3

使用 AMPKα (D63G4) Rabbit mAb 对 HeLa、K-562、C6 和 Neuro-2a 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 4

使用 Phospho-Raptor (Ser792) Antibody(左上和下)或 Raptor Antibody #2280(右上和下)对未经处理或经 AICAR(0.5 mM,30 分钟)或 oligomycin(0.5 μM,30 分钟)处理的 C2C12 或 293 细胞进行蛋白质印迹分析。

200 kDa 的交叉反应条带*。

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免疫印迹法图像 5

使用 Raptor (24C12) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 6

使用 Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb 对未处理的或经 oligomycin #9996(0.5 μM,持续30 分钟)处理的 MCF7 细胞提取物,以及未处理的或经过氧化氢(10 mM,持续5分钟)处理的 C2C12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 7

使用 Phospho-ULK1 (Ser757) Antibody(上图)或总 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb #8054(下图)对未经处理的 (-)、已经 Torin 1 处理(+;250 nM;5 小时)、或已经 INK128 处理(+;250 nM;5 小时)的 A172 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 8

使用 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 9

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

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免疫组织化学(石蜡)图像 10

使用 Phospho-AMPKα (T172) (40H9) Rabbit mAb,对对照(左)或经苯乙双胍处理(右)的石蜡包埋的 NCI-H228 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

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免疫印迹法图像 11

使用 Phospho-Raptor (Ser792) Antibody(上)或 Raptor Antibody #4978(下)对未经处理或经 AICAR(2 mM,1 小时)处理的野生型 (WT) 以及 AMPKα1 和 α2 敲除 (KO) 小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 进行蛋白质印迹分析。(图像由 Salk 生物研究所的 Reuben Shaw 博士提供)。

60、70 和 240 kDa 的交叉反应条带*。

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免疫印迹法图像 12

使用 Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb(左图)对未处理的或经 oligomycin #9996(0.5 µM,持续30 分钟)处理的 MCF7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。使用磷酸化(中间图)或在 ULK1 的 Ser555 周围区域的非磷酸化肽(右图)来预孵育抗体,从而证实磷酸化的特异性。

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免疫印迹法图像 13

使用 Phospho-ULK1 (Ser757) Antibody(上图)或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125(下图)对未经处理或已经 Human Epidermal Growth Factor (hEGF) #8916(100 ng/ml,30 分钟)处理的 A-431 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 14

使用 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对野生型 MEF 和 ULK1 (-/-) MEF 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。MEF 细胞由 Reuben Shaw 博士 (Salk Institute, La Jolla, CA) 惠赠。

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免疫组织化学(石蜡)图像 15

使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

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免疫印迹法图像 16

使用 Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb(上图)或 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb #8054(下图)对未处理的 (-) 或经羰基氰化物3-氯苯腙(CCCP)(100 μM,持续2 小时; +)处理的 MCF7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫组织化学(石蜡)图像 17

使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。

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免疫组织化学(石蜡)图像 18

使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人卵巢癌细胞进行免疫组织化学分析。

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产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb 2535 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
H M R Hm Mk Dm Sc 62 兔 IgG
AMPKα (D63G4) Rabbit mAb 5832 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk B 62 兔 
Phospho-Raptor (Ser792) Antibody 2083 20 µl
  • WB
H M R 150 兔 
Raptor (24C12) Rabbit mAb 2280 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 150 兔 
Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb 5869 20 µl
  • WB
  • IP
H M 140-150 兔 IgG
Phospho-ULK1 (Ser757) Antibody 6888 20 µl
  • WB
H M Mk 140-150 兔 
ULK1 (D8H5) Rabbit mAb 8054 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 150 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
山羊 

ULK1 Antibody Sampler Kit 是研究 ULK1 信号转导的一种高性价比方式。该试剂盒包含足量的一抗,每个一抗可进行两次蛋白质印迹分析。

ULK1 (D8H5) Rabbit mAb、Raptor (24C12) Rabbit mAb 和 AMPKα (D63G4) Rabbit mAb 可识别任何磷酸化状态下对应内源水平的总靶标蛋白。仅当 ULK1 在特定残基上被磷酸化时,Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb 和 Phospho-ULK1 (Ser757) Antibody 才能识别内源水平的 ULK1 。仅当 Raptor 在 Ser792 被磷酸化时,Phospho-Raptor (Ser792) Antibody 才能识别内源水平的 raptor 。仅当 AMPKα 在 Thr172 被磷酸化时,Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb 才能识别内源水平的 AMPKα 。

使用与人 ULK1 蛋白的 Ser555 周围的残基或人 AMPKα 蛋白的 Thr172 周围的残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生激活状态的特异性单克隆抗体。使用与人 raptor 蛋白、人 AMPKα 蛋白的 Lys40 周围的残基或人 ULK1 蛋白的 Arg600 周围的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 ULK1 蛋白的 Ser757 周围的残基或人 raptor 蛋白的 Ser792 周围的残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生激活状态的特异性多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

两种有关的丝氨酸/苏氨酸激酶类 UNC-51-激酶 1 和 2 (ULK1, ULK2) 被发现是秀丽隐杆线虫基因 UNC-51 的哺乳动物同源物,其中突变体表现出异常的轴突延伸和生长 (1-4)。两种蛋白均广泛表达,并且包含一个后跟一个中央脯氨酸/丝氨酸富集结构域的氨基末端激酶结构域以及一个高度保守的羧基末端结构域。ULK1 和 ULK2 在轴突生长中的作用与有关研究相关,这些研究表明激酶位于神经元生长锥,并且与 NGF 等关键生长因子的内吞有关 (5)。酵母双杂交研究发现,ULK1/2 能结合内吞通路的调节物,如 SynGAP 和 syntenin (6)。使用酵母自噬蛋白 Atg1/Apg1 还可识别 ULK1/2 的结构相似性 (7)。使用 siRNA 的敲除实验表明,ULK1 对自噬非常重要 (8),自噬是一种降解大量细胞浆内含物的分解代谢过程 (9,10)。Atg1/ULK1 似乎能够作为控制自噬的多重信号聚焦点 (11),并且能结合许多自噬相关 (Atg) 蛋白,从而调节磷酸化状态和蛋白转运 (12-16)。

Raptor 介导 mTORC1 与 ULK1 的结合,从而在营养充足的条件下磷酸化和抑制 ULK1。AMPK 还直接结合 ULK1,并在营养不足时随时通过磷酸化 raptor 和抑制自噬来逆转 mTORC1 的抑制效果 (17,18)。

  1. Ogura, K. et al. (1994) Genes Dev 8, 2389-400.
  2. Kuroyanagi, H. et al. (1998) Genomics 51, 76-85.
  3. Yan, J. et al. (1998) Biochem Biophys Res Commun 246, 222-7.
  4. Yan, J. et al. (1999) Oncogene 18, 5850-9.
  5. Zhou, X. et al. (2007) Proc Natl Acad Sci USA 104, 5842-7.
  6. Tomoda, T. et al. (2004) Genes Dev 18, 541-58.
  7. Matsuura, A. et al. (1997) Gene 192, 245-50.
  8. Chan, E.Y. et al. (2007) J Biol Chem 282, 25464-74.
  9. Reggiori, F. and Klionsky, D.J. (2002) Eukaryot. Cell 1, 11-21.
  10. Codogno, P. and Meijer, A.J. (2005) Cell Death Differ. 12 Suppl 2, 1509-18.
  11. Stephan, J.S. and Herman, P.K. (2006) Autophagy 2, 146-8.
  12. Okazaki, N. et al. (2000) Brain Res Mol Brain Res 85, 1-12.
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  15. Lee, S.B. et al. (2007) EMBO Rep 8, 360-5.
  16. Hara, T. et al. (2008) J Cell Biol 181, 497-510.
  17. Shang, L. et al. (2011) Proc Natl Acad Sci U S A 108, 4788-93.
  18. Lee, J.W. et al. (2010) PLoS One 5, e15394.
Entrez-Gene Id
5562 , 5563 , 57521 , 8408
Swiss-Prot Acc.
Q13131P54646Q8N122O75385
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

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