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47767
Tricarboxylic Acid Cycle Antibody Sampler Kit
一抗

Tricarboxylic Acid Cycle Antibody Sampler Kit #47767

免疫印迹法图像 1

使用 Fumarase (D9C5) Rabbit mAb(上)和 Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278(下)对未经转染 (-) 或经编码人延胡索酸酶的 Myc 标记 cDNA 表达结构转染 (hFumarase-Myc; +) 对 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 2

使用 IDH2 (D8E3B) Rabbit mAb 对 MCF7 和 ACHN 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 3

使用 IDH1 (D2H1) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 4

使用 Citrate Synthase (D7V8B) Rabbit mAb,对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 5

使用 ACO2 (D6D9) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 6

使用 MPC2 (D4I7G) Rabbit mAb,对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 7

使用 MPC1 (D2L9I) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 8

使用 DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 9

使用 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 10

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

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免疫印迹法图像 11

使用 Fumarase (D9C5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫沉淀图片 12

对 Hep G2 细胞提取物 IDH2 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 IDH2 (D8E3B) Rabbit mAb。使用 IDH2 (D8E3B) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

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流式细胞术图像 13

使用与浓度匹配的

Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(红色)相对比的 IDH1 (D2H1) Rabbit mAb(蓝色),对 HeLa 细胞进行流式细胞分析。

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IF-IC 图像 14

使用 Citrate Synthase (D7V8B) Rabbit mAb (绿色),对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 DyLight™ 554 Phalloidin #13054 标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

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IF-IC 图像 15

使用 ACO2 (D6D9) XP® Rabbit mAb(绿色)对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析显示,其与被 MitoTracker® Red CMXRos(红色)标记的线粒体共定位。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

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免疫印迹法图像 16

使用 MPC1 (D2L9I) Rabbit mAb(上)、DYKDDDDK Tag (9A3) Mouse mAb #8146(上中)、HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb #3724(下中)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对转染空载 (-)或转染带有 DDK 标签的全长人 MPC1 蛋白(hMPC1-DDK;+)或 HA 标签的全长人 MPC2 蛋白(hMPC2-HA;+)表达载体的 293 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。两种表达载体均由 University of Utah School of Medicine 的 Jared Rutter 博士的实验室惠赠。

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免疫沉淀图片 17

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb(泳道 3)对 Hela 细胞提取物进行免疫沉淀法分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Light-Chain Specific) (L57A3) mAb #3677 和 Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076 可用作二抗。

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免疫沉淀图片 18

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb(泳道 3),对 HeLa 细胞提取物 SDHA 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

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IF-IC 图像 19

使用 IDH1 (D2H1) Rabbit mAb(绿色)对 293T 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

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免疫沉淀图片 20

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP ® Isotype Control #3900(泳道 2)或 MPC1 (D2L9I) Rabbit mAb(泳道 3),对 Huh7 细胞提取物 MPC1 进行免疫沉淀 。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 MPC1 (D2L9I) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

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IF-IC 图像 21

使用 DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb(绿色)对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。用 DY-554 phalloidin 对肌动蛋白丝进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

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免疫组织化学(石蜡)图像 22

在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。

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IF-IC 图像 23

使用 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色),对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

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产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Fumarase (D9C5) Rabbit mAb 4567 20 µl
  • WB
H M R Hm Mk 49 兔 IgG
IDH2 (D8E3B) Rabbit mAb 56439 20 µl
  • WB
  • IP
H M R 43 兔 IgG
IDH1 (D2H1) Rabbit mAb 8137 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
H M R Mk 46 兔 IgG
Citrate Synthase (D7V8B) Rabbit mAb 14309 20 µl
  • WB
  • IF
H M R Hm Mk 45 兔 IgG
ACO2 (D6D9) XP® Rabbit mAb 6571 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
H M R Hm Mk 85 兔 IgG
MPC2 (D4I7G) Rabbit mAb 46141 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 14 兔 IgG
MPC1 (D2L9I) Rabbit mAb 14462 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 12 兔 IgG
DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb 11954 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
H 50 兔 IgG
SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb  11998 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
H M R Hm Mk 70 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
山羊 

Tricarboxylic Acid Cycle Sampler Kit 是一种经济合算的方法,可用来检测与三羧酸循环有关的特定组分。该试剂盒含有足量的一抗,每种抗体至少可进行两次蛋白质印迹实验。

试剂盒中每个抗体可识别其内标水平的总特异性靶标蛋白。IDH1 (D2H1) Rabbit mAb 不能识别内源性 IDH2 蛋白,但当重组过表达时,可识别 IDH2。IDH2 (D8E3B) Rabbit mAb 不会与 IDH1 蛋白发生交叉反应。MPC1 (D2L9I) Rabbit mAb 不会与 MPC2 蛋白发生交叉反应。MPC2 (D4I7G) Rabbit mAb 不会与 MPC1 蛋白发生交叉反应。

使用分别与人 ACO2 蛋白中 Gly540 周围的残基、与人柠檬酸合成酶蛋白中羧基末端周围的残基、与人 DLST 蛋白中 Pro188 周围的残基、与人延胡索酸酶蛋白中 Gly354 周围的残基、与人 IDH1 蛋白中 Arg222 周围的残基、与人 IDH2 蛋白中 Val195 周围的残基、与人 MPC1 蛋白中羧基末端周围的残基、与人 MPC2 蛋白中 Asn33 周围的残基以及与人 SDHA 蛋白中 Gly166 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

三羧酸 (TCA) 循环包括各种酶促反应,它们构成细胞好氧呼吸的一个关键部分。在TCA循环中糖酵解终产物丙酮酸转运入线粒体及丙酮酸的脱羧通过需氧条件下氧化磷酸化产生能量 (1,2)。两种线粒体内膜蛋白,线粒体丙酮酸载体蛋白 1 (MPC1) 和线粒体丙酮酸载体蛋白 2 (MPC2),形成 150 kDa 复合体并且是丙酮酸协助转运入线粒体中的必需蛋白 (1,2)。柠檬酸合成酶可催化 TCA 循环的第一个限速反应 (3)。线粒体乌头酸酶 2 (ACO2) 可催化通过顺乌头酸将柠檬酸转化为异柠檬酸的过程 (4)。IDH1 和 IDH2 是三种异柠檬酸脱氢酶中的两种,能催化异柠檬酸氧化脱羧形成 α 酮戊二酸 (α-KG)。(5)。IDH1 可作为细胞浆和过氧物酶体中的抑癌基因,而 IDH2 则位于线粒体,并参与 TCA 循环 (5)。IDH2 突变还可在恶性胶质瘤中被发现 (6)。二氢硫辛酰胺琥珀酰转移酶 (DLST) 是 α 酮戊二酸脱氢酶复合体(TCA 循环中的一种关键酶复合体)的亚基 (7)。琥珀酸脱氢酶亚基 A (SDHA) 是 TCA 循环和电子转移链的一个组分,并与琥珀酸酯氧化有关 (8)。延胡索酸酶可催化将延胡索酸酯转化为苹果酸酯的过程 (9)。延胡索酸酶缺失会导致延胡索酸酯的聚集,延胡索酸酯经证实是一种可促进上皮-间质细胞转换 (EMT) 的致癌代谢物,EMT 是一个与肿瘤发生有关的发育过程 (10)。

  1. Herzig, S. et al. (2012) Science 337, 93-6.
  2. Bricker, D.K. et al. (2012) Science 337, 96-100.
  3. Lin, C.C. et al. (2012) Sci Rep 2, 785.
  4. Tohyama, S. et al. (2016) Cell Metab 23, 663-74.
  5. Zhao, S. et al. (2009) Science 324, 261-5.
  6. Yan, H. et al. (2009) N Engl J Med 360, 765-73.
  7. Diaz-Muñoz, M.D. et al. (2015) Nat Immunol 16, 415-25.
  8. Renkema, G.H. et al. (2015) Eur J Hum Genet 23, 202-9.
  9. Wang, T. et al. (2017) Nat Cell Biol 19, 833-843.
  10. Sciacovelli, M. et al. (2016) Nature 537, 544-547.
Entrez-Gene Id
50 , 1431 , 1743 , 2271 , 3417 , 3418 , 51660 , 25874 , 6389
Swiss-Prot Acc.
Q99798 , O75390 , P36957 , P07954 , O75874 , P48735 , Q9Y5U8 , O95563 , P31040
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalFire 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
XP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
LumiGLO 是 Kirkegaard & Perry Laboratories 的注册商标。
Tween 是 ICI Americas, Inc. 的注册商标。

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电子邮件:
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网址:
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