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59187
Beclin-1 Complex Antibody Sampler Kit
一抗

Beclin-1 Complex Antibody Sampler Kit #59187

引用 (0)

使用 Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

使用 PI3 Kinase Class III (D9A5) Rabbit mAb 对小鼠脑和 C6 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

使用 PIK3R4 Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

对 HCT 116 细胞提取物 Atg14 进行免疫沉淀法分析。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 沉淀,泳道 3 为 Atg14 (D1A1N) Rabbit mAb。使用 Atg14 (D1A1N) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。构象特异性二抗用于避免与 IgG 发生反应。

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb(泳道 3)对 PANC-1 细胞提取物中的 UVRAG 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

使用 Rubicon (D9F7) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

使用 Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb #3495(上)或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125(下)对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® Beclin-1 siRNA I #6222 (+) 或 SignalSilence® Beclin-1 siRNA II (+) 转染的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb 可确认 Beclin-1 的表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作观察上样量和 Beclin-1 siRNA 的特异性。

使用 Atg14 (D1A1N) Rabbit mAb(上)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #84576(下)对 HCT 116 和 HCT 116/Atg14 shRNA 敲除型细胞提取物进行蛋白质印迹分析。HCT 116/Atg14 shRNA 细胞由 University of Minnesota, Minneapolis, MN Do-Hyung Kim 博士友情提供。

使用 UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。HCT 116细胞被证实含有可导致 UVRAG 内源性表达水平显著降低的单等位基因移码突变 (11)。

使用 Rubicon (D9F7) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或经 人 Rubicon (hRubicon, +) 转染的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Rubicon 构建体由 University of California, Berkeley, CA 的 Qing Zhong 博士惠赠。

使用 Atg14 (D1A1N) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

使用 UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或经构建表达的人 UVRAG (hUVRAG; +) 转染的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

购买 # 59187T
产品货号 规格 价格 库存
59187T
1 个试剂盒(6 x 20 µl)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb 3495 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 60 兔 IgG
PI3 Kinase Class III (D9A5) Rabbit mAb 4263 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 100 兔 
PIK3R4 Antibody 14580 20 µl
  • WB
H M R 153 兔 
Atg14 (D1A1N) Rabbit mAb 96752 20 µl
  • WB
  • IP
H M R 65 兔 IgG
UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb 13115 20 µl
  • WB
  • IP
H M 90 兔 IgG
Rubicon (D9F7) Rabbit mAb 8465 20 µl
  • WB
H M 130 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
山羊 

产品说明

Beclin-1 Complex Antibody Sampler Kit 提供一种经济合算的方法来检测属于 Beclin-1 复合体一部分的蛋白。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/敏感性

Beclin-1 Complex Antibody Sampler Kit 中的每种抗体都能检测其靶蛋白的内源水平。Rubicon (D9F7) Rabbit mAb 可检测在 55 kDa 处的来源不明的条带。

来源/纯化

使用与人 Beclin-1 中 Thr72、人 III 类 PI3 激酶中 Lys630、人 Atg14 中 Arg70、人 UVRAG 中 Gly502 以及人 Rubicon 中 Leu210 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 PIK3R4 蛋白中 Gly825 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白质 A 和肽亲和色谱对抗体进行纯化。

背景

许多研究发现了含有 Beclin-1 和 III 类PI3K 激酶的不同复合体,它们在自噬和囊泡运输中有特定作用 (1,2)。这些复合体通常含有 Beclin-1、PI3KC3/VSP34 和 PIK3R4/VPS15,可催化磷脂酰肌醇在 D3 位点的磷酸化,从而生成磷脂酰肌醇-3-磷酸。PI3KC3 活性的特异性受其他结合伴侣调节。复合体 1 含有 Atg14,Atg14 是自噬体成核早期所需的 (3,4)。复合体 2 缺乏 Atg14,但是含有 UVRAG,UVRAG 对自噬体成熟和内吞转运很重要 (4-6)。第三种复合体同时含有 UVRAG 和 Rubicon,可负向调节典型自噬 (7,8)。重要的是,这种含有 Rubicon 的复合体对于 LC3 相关吞噬 (LAP) 有关过程至关重要,在这个过程中,结合细胞表面受体的胞外病原体被单层膜吞噬体吞噬,并被溶酶体降解 (9,10)。

  1. Levine, B. and Kroemer, G. (2019) Cell 176, 11-42.
  2. Mei, Y. et al. (2016) Protein Sci 25, 1767-85.
  3. Sun, Q. et al. (2008) Proc Natl Acad Sci U S A 105, 19211-6.
  4. Itakura, E. et al. (2008) Mol Biol Cell 19, 5360-72.
  5. Liang, C. et al. (2006) Nat Cell Biol 8, 688-99.
  6. Liang, C. et al. (2008) Nat Cell Biol 10, 776-87.
  7. Matsunaga, K. et al. (2009) Nat Cell Biol 11, 385-96.
  8. Zhong, Y. et al. (2009) Nat Cell Biol 11, 468-76.
  9. Martinez, J. et al. (2015) Nat Cell Biol 17, 893-906.
  10. Heckmann, B.L. and Green, D.R. (2019) J Cell Sci 132(5). pii: jcs222984. doi: 10.1242/jcs.222984.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。

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