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8666
Autophagosome Marker Antibody Sampler Kit

Autophagosome Marker Antibody Sampler Kit #8666

免疫印迹法图像 1

使用 Atg12 Antibody (Human Specific) 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 2

使用 LC3A (D50G8) XP® Rabbit mAb 对未处理或用氯喹处理(50 μM,过夜)的 HeLa 和 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 3

使用 LC3B (D11) XP® Rabbit mAb(上)或 LC3B Antibody #2775 对未处理 (-) 或用氯喹过夜处理 (50 μM) (+) 的不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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免疫印迹法图像 4

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

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IF-IC 图像 5

使用 Atg12 Antibody (Human Specific)(绿色)对未经处理的(左)或经 chloroquine 处理(右)的 HCT-116 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

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免疫组织化学(石蜡)图像 6

使用 LC3A (D50G8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类多形性恶性胶质瘤进行免疫组织化学分析。

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免疫印迹法图像 7

使用 LC3B (D11) XP® Rabbit mAb #3868 and α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125 对用 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® LC3B siRNA I #6212 (+) 或 SignalSilence® LC3B siRNA II #6213 (+) 转染的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。LC3B (D11) XP® Rabbit mAb 可确认 LC3B 的表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用于 LC3B siRNA 的上样和特异性对照。

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免疫组织化学(石蜡)图像 8

使用 LC3A (D50G8) XP® Rabbit mAb(左)或

Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(右)对石蜡包埋的人类结肠癌进行免疫组织化学分析。

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免疫组织化学(石蜡)图像 9

在对照肽(左)和抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 LC3B (D11) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类星形细胞瘤进行免疫组织化学分析。

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免疫组织化学(石蜡)图像 10

使用 LC3A (D50G8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋对照组(左)或氯喹处理组(右)HeLa 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

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免疫组织化学(石蜡)图像 11

使用 LC3B (D11) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的对照组(左)或氯喹处理组(右)HeLa 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

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流式细胞术图像 12

使用与非特异性阴性对照抗体(红色)相对比的 LC3B (D11) XP® Rabbit mAb(蓝色),对 HeLa 细胞进行流式细胞分析。

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IF-IC 图像 13

使用 LC3B (D11) XP® Rabbit mAb(绿色)和 β-Catenin (L54E2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 555 接合) #5612(红色) 对未处理(左)或用氯喹处理(50 uM 过夜处理,右)的 HCT-116 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

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产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Atg12 Antibody (Human Specific) 2010 20 µl
  • WB
  • IF
H 16, 55 兔 
LC3A (D50G8) XP® Rabbit mAb 4599 20 µl
  • WB
  • IHC
H M R 14, 16 兔 IgG
LC3B (D11) XP® Rabbit mAb 3868 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
H M R 14, 16 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
山羊 

Autophagosome Marker Antibody Sampler Kit 提供了一种检测细胞中自噬体累积的经济手段。该试剂盒包含的一抗和二抗足以针对每种一抗进行 2 次蛋白质印迹实验。

Autophagosome Marker Antibody Sampler Kit 中每个抗体可检测其对应总蛋白的内源水平。Atg12 Antibody (Human Specific) 可识别游离 Atg12 以及 Atg12-Atg5 结合物。LC3A (D50G8) XP® Rabbit mAb 和 LC3B (D11) XP® Rabbit mAb 可能与其他 LC3 同工型发生交叉反应,并与 II 型结构有更强的反应性。

使用与人类 Atg12 蛋白氨基末端附近残基、人类 LC3A 蛋白氨基末端附近残基、或人类 LC3B 蛋白氨基末端附近残基或相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (1,2)。通常在营养剥夺条件下激活自噬,但自噬也与一些生理过程有关,如发育、分化、神经变性、感染和癌症 (3)。已在酵母中大量发现自噬的分子机制,被称为 (Atg)。自噬体的形成涉及一个泛素样接合体系,其中,Atg12 共价结合 Atg5,并靶向至自噬小泡 (4-6)。这种偶联反应由泛素 E1 样酶 Atg7 和 E2 样酶 Atg10 介导 (7,8)。自噬标记轻链 3 (LC3) 最初识别为微管相关蛋白 1A 和 1B(称为 MAP1LC3)的亚基 (9) ,随后发现与对自噬十分关键的酵母蛋白 Apg8/Aut7/Cvt5 相似 (10)。在自噬期间,有 3 种人类 LC3 同工型(LC3A、LC3B 和 LC3C)发生翻译后修饰 (11-14)。合成后在 LC3 羧基末端迅速裂解,可产生胞质的 LC3-I 型。在自噬过程中,通过一个涉及 Atg7 和 Atg3 的类泛素体系,LC3-I 被脂质化为 LC3-II,从而将 LC3 与自噬小泡结合 (11-15)。自噬体中存在 LC3 ,以及 LC3 向低迁移形式的 LC3-II 的转化被视为发生自噬的“指示器” (16)。

  1. Reggiori, F. and Klionsky, D.J. (2002) Eukaryot Cell 1, 11-21.
  2. Codogno, P. and Meijer, A.J. (2005) Cell Death Differ 12 Suppl 2, 1509-18.
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  7. Suzuki, K. et al. (2001) EMBO J 20, 5971-81.
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  13. Wu, J. et al. (2006) Biochem. Biophys. Res. Commun. 339, 437-42.
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  15. Tanida, I. et al. (2004) J. Biol. Chem. 279, 47704-10.
  16. Ichimura, Y. et al. (2000) Nature 408, 488-92.
Entrez-Gene Id
9140 , 84557 , 81631
Swiss-Prot Acc.
O94817 , Q9H492 , Q9GZQ8
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

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