反应性 | H |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 9、100-140 |
同型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
免疫荧光法(冰冻) | 1:100 - 1:200 |
免疫荧光法(免疫细胞化学) | 1:100 - 1:200 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。不要分装抗体。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
建议使用偶联荧光素的抗兔二抗:
注意:首次使用一抗或荧光物质标记的二抗时,用滴定法检测抗体,以确定哪种稀释度会在最低的背景下为您的样品产生最强的特定信号。
切片用 1X PBS 中稀释的 4% 甲醛浸没。
注意:甲醛有毒性,仅可在通风橱中使用。
注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。
发布于 2006 年 11 月
修订于 2016 年 7 月
实验步骤编号:151
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注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
建议使用偶联荧光素的抗兔二抗:
注意:细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。
吸干液体,随后在细胞上覆盖一层 2–3 mm 用 1X PBS 稀释的 4% 甲醛。
注意:甲醛有毒性,需在通风橱中使用。
注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。
发布于 2006 年 11 月
修订于 2013 年 11 月
实验步骤编号:24
APP (E5X2B) Rabbit mAb 可识别 APP 总蛋白的内源水平。该产物的抗原序列与相应的小鼠序列同源100%,但是在野生型小鼠脑中未见信号,这可能是由于敏感性。
物种反应性:人
基于 100% 序列同源性预测发生反应的物种:小鼠
使用与人 APP 蛋白的羧基末端附近的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
β 淀粉样蛋白 (Aβ) 前体蛋白 (APP) 是一种 100-140 kDa 跨膜糖蛋白,拥有多个同工型 (1)。APP 的氨基酸序列中所包含的淀粉样蛋白结构域能够通过两步蛋白剪切反应得到释放 (1)。释出的 A-β 片段在细胞外沉积积累,形成阿尔茨海默病中淀粉样斑块中主要的组分 (1)。APP 可在多个位点被磷酸化,这会影响蛋白本身的裂解加工和分泌过程 (2-5)。周期素依赖性激酶在 Thr668(APP695 同工型对应的位点)的磷酸化依赖于细胞周期,并在 G2/M 期达到峰值 (4)。在 Thr668 位点被磷酸化的 APP 存在于成年大鼠大脑中,且与培养的神经细胞的分化有关 (5,6)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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