同时购买 1 支总蛋白抗体和 1 支 PTM 抗体,即可获得 1 份价值高达 1999 元的免费抗体或试剂。 | 点击此处 >>
28692
5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb
MeDIP 试剂盒与试剂

5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb #28692

MeDIP

使用 SimpleDIP™ Methylated DNA IP (MeDIP) Kit #76853 对 1 μg NCCIT 细胞基因组 DNA 与 10 μl 5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb #28692 或 10 μl Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (DIP Formulated) #75708 进行 DNA 免疫沉淀。使用 human Aqp2 intron 5 primers、 human TIMP3 promoter primers、SimpleDIP™ Human Testis-Specific H2B Promoter Primers #65822 和 SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每种样品中免疫沉淀的 DNA 的量以相对于输入 DNA 总量(等于 1)的信号进行表述。

了解有关我们如何获得图像的详情
MeDIP

使用 SimpleDIP™ Methylated DNA IP (MeDIP) Kit #76853 对 1 μg 小鼠胚胎干细胞基因组 DNA 与 10 μl 5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb #28692 或 10 μl Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (DIP Formulated) #75708 进行 DNA 免疫沉淀。使用 mouse Aqp2 exon 1 primers、SimpleDIP™ Mouse Intracisternal-A Particle (IAP) LTR Primers #74803、mouse Lamc3 exon 1 primers 和 SimpleChIP® Mouse GAPDH Intron 2 Primers #8986,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每种样品中免疫沉淀的 DNA 的量以相对于输入 DNA 总量(等于 1)的信号进行表述。

了解有关我们如何获得图像的详情
IF-IC

使用 5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb(绿色)和 DYKDDDDK Tag (9A3) Mouse mAb #8146(红色),对转染表达带有 DYKDDDDK 标签的 TET1 催化结构域 (TET1-CD) 表达载体的 293T 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。正如预期的一样,表达 TET1-CD(红色)的 293T 细胞出现 5-甲基胞嘧啶(绿色)水平下降。

了解有关我们如何获得图像的详情
点印迹-DNA

HCT 116 野生型 (WT) 和 DNMT1/DNMT3B 敲除 (KO) 细胞的 DNA 片段被印迹到尼龙膜上,经紫外线交联并使用 5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb 进行检测。顶部小图显示了抗体可检测野生型细胞中更多甲基化的胞嘧啶,而底部小图则显示用亚甲蓝染色的膜。

了解有关我们如何获得图像的详情
点印迹-DNA

5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb 的特异性通过斑点印迹实验进行确定。仅使用未修饰的胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶 (5-mC)、5-羟甲基胞嘧啶 (5-hmC)、5-羧基胞嘧啶 (5-caC) 或 5-甲酰基胞嘧啶 (5-fC) 进行 PCR 可产生相同序列的 387 碱基对 DNA 片段。对应的 DNA 片段被印迹到尼龙膜上,经紫外线交联并使用 5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb 进行检测。顶部小图显示抗体仅结合含 5-mC 的 DNA 片段,而底部小图则显示用亚甲蓝染色的膜。

了解有关我们如何获得图像的详情
ELISA-DNA 寡聚物

5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb 的特异性通过 ELISA 进行确定。使用含有未修饰的胞嘧啶或差异性修饰的胞嘧啶(5-mC、5-hmC、5-caC、5-fC)的单链 DNA 寡聚物滴定抗体。如图表所示,该抗体仅结合含 5-mC 的寡核苷酸。

了解有关我们如何获得图像的详情
MeDIP

5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb 的特异性通过 DNA 免疫沉淀进行确定。对用小鼠胚胎干细胞制备且加入含有未甲基化胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶 (5-mC) 或 5-羟甲基胞嘧啶 (5-hmc) 的对照 DNA 的基因组 DNA 进行 DNA 免疫沉淀。使用 5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb 和 SimpleDIP™ Methylated DNA IP (MeDIP) Kit #76853 进行免疫沉淀。使用与内标的对照 DNA 序列特异的引物,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每种样品中免疫沉淀的 DNA 的量以相对于输入 DNA 总量(等于 1)的信号进行表述。

了解有关我们如何获得图像的详情
应用 稀释度
免疫荧光法(免疫细胞化学) 1:1600
DNA 点印迹 1:1000
甲基化 DNA 免疫沉淀 1:50
存储:

保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。

5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb 可识别内源水平的 5-甲基胞嘧啶。该抗体现已使用 ELISA、斑点印迹和 MeDIP 测定法进行了验证,并且表明对 5-甲基胞嘧啶有高特异性。

物种反应性:

预期的所有物种

使用 5-甲基胞苷对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

DNA 在胞嘧啶残基的甲基化属于可遗传、表观遗传修饰,对正确调节基因表达、基因组印迹和哺乳动物发育至关重要 (1,2)。5-甲基胞嘧啶是通过两种酶 DNMT3a 和 DNMT3b从头确立的阻抑性表观遗传标记物,并且由 DNMT1 维持 (3, 4)。早先认为,5-甲基胞嘧啶在 DNA 复制期间被动耗尽。然而,后续研究已经证实 Ten-Eleven 转运 (TET) 蛋白 TET1、TET2、和 TET3 可以催化甲基化的胞嘧啶氧化成 5-羟甲基胞嘧啶 (5-hmC) (5)。此外,TET 蛋白还可以氧化 5-hmC 形成 5-甲酰基胞嘧啶 (5-fC) 和 5-羧基胞嘧啶 (5-caC),二者均由胸腺嘧啶-DNA 糖基化酶 (TDG) 切除,从而将胞嘧啶氧化与碱基切除修复通路有效联系,并且支持活跃的胞嘧啶去甲基化 (6,7)。

通常,DNA 甲基化以双模式方式发生,因此 CpG 二核苷酸主要在基因组内被甲基化,但与基因启动子相关的 CpG 富集序列的短延伸区(称为 CpG 岛)除外,这个区域几乎没有甲基化 (8)。癌细胞基因组通常总体被低甲基化,而 CpG 岛则被超甲基化,导致相关启动子受到抑制 (9)。有证据表明,在癌细胞中发现的大量异常超甲基化 CpG 岛存在于 RB1、MLH1 和 BRCA1 等抑癌基因中 (10)。

  1. Hermann, A. et al. (2004) Cell Mol Life Sci 61, 2571-87.
  2. Turek-Plewa, J. and Jagodziński, P.P. (2005) Cell Mol Biol Lett 10, 631-47.
  3. Okano, M. et al. (1999) Cell 99, 247-57.
  4. Li, E. et al. (1992) Cell 69, 915-26.
  5. Tahiliani, M. et al. (2009) Science 324, 930-5.
  6. He, Y.F. et al. (2011) Science 333, 1303-7.
  7. Ito, S. et al. (2011) Science 333, 1300-3.
  8. Suzuki, M.M. and Bird, A. (2008) Nat Rev Genet 9, 465-76.
  9. Berman, B.P. et al. (2012) Nat Genet 44, 40-6.
  10. Sproul, D. and Meehan, R.R. (2013) Brief Funct Genomics 12, 174-90.
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SimpleChIP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
SimpleDIP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
XP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
DRAQ5 是 Biostatus Limited 的注册商标。

实验桌前的资讯

包括获取 CST 最新发展信息,接收我们最新的应用指南,获悉我们的科学新知以及了解我们的产品。

订阅

中国分公司 (PRC)

赛信通(上海)生物试剂有限公司

上海浦东新区

盛夏路 399 号

亚芯科技园 7 号楼

201210​

中国

电话:
+86-21-58356288
传真:
+86-21-58356116
电话:
4006-473287/GreatQ [免费电话]
电子邮件:
info@cst-c.com.cn
网址:
www.cst-c.com.cn

需要不同国家或地区的信息?请点击此处

如需获得有关本品的当地订购信息,请点击此处

Powered By OneLink