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SimpleChIP® Universal qPCR Master Mix
ChIP 试剂盒与试剂

SimpleChIP® Universal qPCR Master Mix #88989

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  1. ChIP

图 1. 连续稀释的输入 DNA 样品的扩增图(左图)和回归曲线(右图)。使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 从 HCT 116 细胞中制备和纯化输入 DNA。对 20(红色线)、4(橙色线)、0.8(紫色线)和 0.016 ng(蓝色线)输入 DNA 与 SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014 进行定量 PCR。显示两次重复检测的数据。

图 2. 引物的相应单熔融峰。对使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 制备的 HCT 116 细胞的输入 DNA 样品与 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486(红色线)、SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014(橙色线)、SimpleChIP® Human CaMK2D Intron 3 Primers #5111(紫色线)或 human c-MYC promoter primers(蓝色线)进行定量 PCR。对于每个引物组,显示两次重复检测的数据。

图 3. 使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对富集的 ChIP DNA 进行定量。对 4 x 106个 HCT 116 细胞的交联染色质与 Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751(左小图)、TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb #2569(右小图)和 Normal Rabbit IgG #2729(两个小图)进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014、human c-Myc promoter primers、SimpleChIP® Human CaMK2D Intron 3 Primers #5111 或 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

存储:

避光保存在 -20°C 下时,本产品可保持稳定 12 个月。它可在多达 30 次冻融循环后保持稳定,并可在 4°C 下避光保存长达 1 个月。

产品说明

SimpleChIP® Universal qPCR Master Mix 是一种最佳的 2X 反应混合物,可用于通过大多数实时 qPCR 仪器的 SYBR/FAM 通道进行实时 qPCR 检测和靶标 DNA 序列定量。它包含热启动 Taq DNA 聚合酶,采用独特的被动参比染料制成,这种染料适用于各种各样的仪器平台(包括那些要求高或低 ROX 参考信号的平台)。它还包含用于防止携带的 dUTP 和一种用于监测反应设置的非荧光可见染料。这种染料不会与用于 qPCR 的荧光染料发生光谱重叠,也不会干扰实时检测。

该产品有 1 ml 容量,足以用于准备 100 次 qPCR 反应,并且适用于 SimpleChIP® enzymatic and sonication ChIP kits 的酶水解和声碎裂片段 DNA 样品。该主混合制剂以 2X 浓度形式提供,包含用于 DNA 扩增和定量所需的所有 PCR 组分,但引物和 DNA 模板除外。

背景

基于染料的定量 PCR (qPCR) 使用双链 DNA (dsDNA) 结合染料(最常见的是 SYBR ® Green I)的实时荧光来测量 DNA 扩增,因为在每个 PCR 循环过程中都会发出荧光。在背景荧光上切实检测到荧光信号的点处,可以确定定量周期或 CT 值。CT 值可用于评估两份或多份样品之间的相对靶标丰度,或参照源于一系列已知稀释度的相应标准曲线来计算绝对靶标数量。qPCR 通常用于检测和定量用染色质免疫沉淀法 (ChIP) 达到富集的基因组 DNA 中的靶基因。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SimpleChIP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
SYBR 是 Molecular Probes, Inc 的注册商标。

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