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40295
Annexin V-PE Early Apoptosis Detection Kit
细胞检测试剂盒

Annexin V-PE Early Apoptosis Detection Kit #40295

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使用 Annexin V-PE Early Apoptosis Detection Kit 对未经(左图)或已经 camptothecin(10 uM,4 小时;右图)处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。

购买 # 40295S
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40295S
1 个试剂盒(100 次检测)

产品包括 数量(计数)
Annexin V-PE Conjugate 1 x 200 µl
10X Annexin V Binding Buffer 2 x 1.5 ml
7-AAD Cell Staining Solution 1 x 1 ml

实验步骤

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流式细胞术,Annexin V-PE Conjugate,7aad

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS) (#9808):要配制 1 L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 到 950 ml dH2O 中,混匀。
  2. 10X 膜联蛋白-V 结合缓冲液:要制备 1 L 1X 膜联蛋白-V 结合缓冲液:添加 1 ml 10X 结合缓冲液到 9 ml dH2O 中,混匀。

B. 染色

  1. 通过离心分离采集目标细胞。
  2. 细胞用冰冷的 PBS 洗涤。
  3. 按 105 或 106 个细胞/ml 在 1x 膜联蛋白 V 结合缓冲液中重悬细胞。分装 96 µl 细胞悬液到一根检测试管中。
  4. 添加 2 μl Annexin V-PE Conjugate 和 10 μl 7aad 染色液到每份 96 μl 细胞悬液中。在阴暗处让细胞在冰上孵育 10 分钟。
  5. 用冰冷的 1X 膜联蛋白 V 结合缓冲液稀释细胞悬液,以获得 250 µl/检测的最终体积。立即分析。

发布​于 2019 年 5 月 

实验步骤编号:1824

产品说明

Annexin V-PE Early Apoptosis Detection Kit 能让研究人员检测某个细胞群的早期凋亡细胞。膜联蛋白 V-PE 偶联的蛋白会结合表达磷脂酰丝氨酸(一种早期凋亡标志物)的细胞表面。染有 7-氨基放线菌素 D (7-AAD)(一种非细胞渗透性 DNA 染料)的细胞是坏死细胞。同时染有 7-AAD 和膜联蛋白 V-PE 的细胞指示晚期凋亡和早期坏死。该试剂盒提供的试剂足以进行 100 次检测(250 μl 检测量)。

特异性/敏感性

物种反应性:

背景

膜联蛋白 V 属于膜联蛋白家族,该家族包括 160 多个成员。所有膜联蛋白家族成员都有一个特征:能以依赖于 Ca2+ 的方式结合带负电荷的磷脂表面 (1)。在早期凋亡期间,磷脂酰丝氨酸 (PS) 从质膜的胞质侧转位到细胞表面。这种转位会将 PS 暴露在胞外环境中,而质膜则保持完整 (2)。膜联蛋白 V 对 PS 具有高亲和力、特异性和敏感性,可用作早期凋亡的一个标记物。为了排除“渗漏的”坏死细胞,膜联蛋白 V 必须合用能确定细胞膜完整性的试剂,如碘化丙啶 (2)。

  1. Boersma, H.H. et al. (2005) J Nucl Med 46, 2035-50.
  2. Vermes, I. et al. (1995) J Immunol Methods 184, 39-51.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
本产品已获得 Tau Technologies BV、美国专利 7,511,016 以及国外同等专利的许可进行销售。

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