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98059
RUNX2 (D1L7F) Rabbit mAb (PE Conjugate)
偶联抗体

RUNX2 (D1L7F) Rabbit mAb (PE Conjugate) #98059

应用

反应性 敏感性 MW (kDa) 同型
H M R 内源性 兔 IgG
流式细胞术

使用 RUNX2 (D1L7F) Rabbit mAb (PE Conjugate) 对 LNCaP(蓝色)和 Saos-2(绿色)细胞进行流式细胞分析。

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针对需甲醇通透的直标抗体的实验步骤(流式细胞术)

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS):(#9808) 要配制 1 L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 到 950 ml dH2O 中,混合均匀。
  2. 16‭‬% 甲醛(无甲醇)
  3. 100% 甲醇
  4. 孵育缓冲液:将 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 溶解于 100 ml 1X PBS 中。储存在 4°C。

B. 固定

注意:如果使用全血,则需在固定前裂解红细胞并通过离心洗涤。

  1. 通过离心收集细胞并吸除上清液。
  2. 在 0.5-1 ml 1 X PBS 中重悬细胞。添加甲醛并使其终浓度为 4% 。
  3. 在室温下固定 15 分钟。
  4. 用足够的 1X PBS 离心洗涤。将上清液丢弃在合适的废液缸中。在 0.5-1 ml 1 X PBS 中重悬细胞。

C. 通透

  1. 通过温和涡旋混合情况下向预冷的细胞中缓慢添加冰冷的 100% 甲醇至 90​% 甲醇的终浓度,以通透细胞。
  2. 在冰上孵育 30 分钟。
  3. 继续进行细胞免疫染色(D 部分)或将细胞储存于 -20°C 的 90% 甲醇中。

D. 免疫染色

  1. 将所需数量的细胞分装进试管或加样孔中。
  2. 通过离心分离,用足够的 1X PBS 洗涤以清除甲醇。将上清液丢弃在合适的废液缸中。如有必要,可重复进行。
  3. 在 100 µl 稀释的直标抗体(按照建议的稀释度在孵育缓冲液中制备)中重悬细胞。
  4. 室温孵育 1 小时。避光保存。
  5. 通过离心分离,用孵育缓冲液洗涤。丢弃上清液。重复操作。
  6. 在 1X PBS 中重悬细胞并用流式细胞分析仪进行分析;或者,如要进行 DNA 染色,那么继续进行可选的 DNA 染色(参见 E 部分)。

E. 可选 DNA 染料

  1. 在 0.5 ml 的 DNA 染料(例如 Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087)中重悬细胞。
  2. 室温孵育至少 5 分钟。
  3. 用流式细胞术分析 DNA 染色液中的细胞。

发布​于 2009 年 7 月 

修订于 2017 年 6 月

实验步骤编号:407

应用 稀释度
流式细胞术 1:50
存储:

保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。储存在 4°C。切勿分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

RUNX2 (D1L7F) Rabbit mAb (PE Conjugate) 可识别内源水平的 RUNX2 总蛋白。

物种反应性:

人, 小鼠, 大鼠

使用与人 RUNX2 蛋白中 Ala273 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

Cell Signaling Technology 的这种抗体接合藻红蛋白 (PE),并可对人体细胞进行了直接的流式细胞术分析内部检测。该抗体的物种交叉反应性预计与非偶联的 RUNX2 (D1L7F) Rabbit mAb #12556 相同。

Runt-相关转录因子 2 (RUNX2) 是转录因子 RUNX 家族的一员。它与成骨细胞分化和骨骼形态发生有关。RUNX2 可通过结合增强子或启动子的核心位点来调节骨桥蛋白、骨唾液蛋白和骨钙蛋白等不同基因的转录 (1-3)。RUNX2 对成骨细胞的成熟以及膜内和软骨内骨化都非常关键。相应 RUNX2 基因突变与骨骼发育障碍颅骨锁骨发育不良 (CCD) 有关 (4-6)。RUNX2 还在前列腺癌和乳腺癌等各种人癌细胞中异常表达。它在前列腺癌和乳腺癌细胞的迁移、浸润和骨转移中发挥重要作用 (7-10)。

  1. Viereck, V. et al. (2002) J Cell Biochem 86, 348-56.
  2. Willis, D.M. et al. (2002) J Biol Chem 277, 37280-91.
  3. Tu, Q. et al. (2008) J Cell Physiol 217, 40-7.
  4. Quack, I. et al. (1999) Am J Hum Genet 65, 1268-78.
  5. Cardoso, B.M. et al. (2010) Clin Dysmorphol 19, 150-2.
  6. Han, M.S. et al. (2010) J Cell Biochem 110, 97-103.
  7. Akech, J. et al. (2010) Oncogene 29, 811-21.
  8. van der Deen, M. et al. (2010) J Cell Biochem 109, 828-37.
  9. Barnes, G.L. et al. (2003) Cancer Res 63, 2631-7.
  10. Barnes, G.L. et al. (2004) Cancer Res 64, 4506-13.
Entrez-Gene Id
860
Swiss-Prot Acc.
Q13950
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。

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