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45378
NK1.1/CD161 (PK136) Mouse mAb (PE Conjugate)
偶联抗体

NK1.1/CD161 (PK136) Mouse mAb (PE Conjugate) #45378

应用

反应性 敏感性 MW (kDa) 同型
M 内源性 小鼠 IgG2a、kappa
流式细胞术

以浓度匹配的小鼠同型对照 (PE 偶联物)(左图)作为对照,使用 NK1.1/CD161 (PK136) 小鼠单克隆抗体 (PE 偶联物) 和共染料 CD3 (17A2) 大鼠单克隆抗体 (APC 偶联物) #24265(右图)对活的小鼠脾细胞进行流式细胞分析。

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流式细胞术

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS):(#9808) 要配制 1 L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 到 950 ml dH2O 中,混合均匀。
  2. 孵育缓冲液:将 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 溶解于 100 ml 1X PBS 中。储存在 4°C。

B. 免疫染色

  1. 使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
  2. 将 0.5-1x106 细胞分装到每个测试管中(按容量)。
  3. 添加 2-3 ml 孵育缓冲液到每支试管,随后通过离心润洗。重复操作。
  4. 在 100 µl 稀释一抗(按照推荐的稀释比例在孵育缓冲液中配制)中重悬细胞。
  5. 室温孵育 1 小时。
  6. 通过离心分离用 2-3 ml 孵育缓冲液洗涤。
  7. 在相应量的 PBS 中重悬细胞,并在流式细胞分析仪上进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

实验步骤编号:1504

为获得最佳的流式细胞术结果,我们建议每次检测使用 0.5 μg 抗体。

应用 稀释度
流式细胞术 1:40
存储:

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶(pH 为 7.2)中。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 6 个月。请不要分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

NK1.1/CD161 (PK136) 小鼠单克隆抗体 (PE 偶联物) 可检测 内源水平的NK1.1/CD161 总蛋白。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

小鼠

对组织培养上清液进行亲和层析纯化即可获得该单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 PE,并在内部对小鼠细胞进行了直接的流式细胞分析检测。

CD161/KLRB1(杀伤细胞凝集素样受体亚家族 B 成员 1,也称 CLEC5B 和 NKR-P1A)是一种在多数自然杀伤 (NK) 细胞、NK T 细胞和某些 T 淋巴细胞中表达的 II 型跨膜蛋白 (1)。CD161/KLRB1 还在 Th17 细胞中表达,可促进其生成并调节其功能 (2)。结合其配体凝集素样转录物 1 (LLT1) 会抑制 NK 细胞功能,但在有 TCR 信号的情况下 LLT1 与 CD161/KLRB1 的相互作用会增强 T 细胞产生 IFN-γ (3,4)。CD161 在啮齿动物中有多种不同的同工型,并且某些可充当激活的受体 (5,6)。

啮齿动物中有一个 Klrb1 基因家族 (7)。PK136 抗体可检测小鼠 KLRB1C 上的一个特异性表位,且常用来检测特定小鼠品系(CE、B6、NZB、C58、Ma/My、ST、SJL、FVB)中的小鼠自然杀伤细胞。但其他小鼠品系(BALB/c、AKR、CBA、C3H、DBA、129)中不存在该表位 (8)。

  1. Lanier, L.L. et al. (1994) J Immunol 153, 2417-28.
  2. Bai, A. et al. (2014) J Immunol 193, 3366-77.
  3. Aldemir, H. et al. (2005) J Immunol 175, 7791-5.
  4. Rosen, D.B. et al. (2005) J Immunol 175, 7796-9.
  5. Carlyle, J.R. et al. (2006) J Immunol 176, 7511-24.
  6. Kirkham, C.L. and Carlyle, J.R. (2014) Front Immunol 5, 214.
  7. Kirkham, C.L. and Carlyle, J.R. (2014) Front Immunol 5, 214.
  8. Carlyle, J.R. et al. (2006) J Immunol 176, 7511-24.
Entrez-Gene Id
17059
Swiss-Prot Acc.
P27814
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

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