Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
25968S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人
使用重组人半乳凝素-9 蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
半乳糖凝集素属于以其对聚-N-乙酰乙酰半乳糖胺富集的糖缀合物的亲和力和其糖结合位点为特征的 β-半乳糖结合蛋白家族 (1,2)。半乳凝素家族成员与细胞黏附 (3)、生长调节 (4)、细胞因子产生 (5)、T 细胞凋亡 (6) 和免疫应答 (7) 等各种生物功能有关。
半乳凝素-9 通过 IFN-γ、TNF-α 和 TLR 配体等促炎性刺激物诱导,并通过与其配体 TIM-3 的相互作用来调控各种免疫应答 (8, 9)。半乳凝素-9 结合 Th1 CD4 T 细胞表达的 TIM-3 会导致 T 细胞死亡 (9)。但使用半乳凝素-9 治疗荷瘤小鼠会增加 IFN-γ 产生的 TIM-3+ CD8 T 细胞和 TIM-3+ 树突细胞的数量 (10)。TIM-3 或半乳凝素-9 在小鼠中的转基因过表达会导致具有骨髓源性抑制细胞表型的细胞增加,并抑制免疫应答 (11)。CD44 还被视为是半乳凝素-9 的一个受体,并且半乳凝素-9 与诱导调节性 T (iTreg) 细胞表达的 CD44 相互作用可增强 iTreg 细胞的功能稳定性。此外,最近的研究表明,半乳凝素-9 结合胰腺导管腺癌浸润性巨噬细胞表达的 Dectin-1,从而重新编程耐受性巨噬细胞,并抑制抗肿瘤免疫。现已在肺癌、肝癌、乳腺癌和肾癌等多种癌症类型的细胞中观察到半乳凝素-9 表达升高 (12)。半乳凝素-9 转录本的选择性剪切会产生多个同工型 (13)。
除非如以 CST 合法授权代表签署的书面形式另行明确同意,否则以下条款适用于 CST、其附属公司或其分销商提供的产品。除非 CST 合法授权代表以书面形式单独接受,否则任何附加于或异于此处所载条款和条件的客户条款和条件均被拒绝且无效。
产品用“仅供研究使用”或类似标示声明标示,并且尚未经 FDA 或其他国外或国内监管实体出于任何目的批准、准许或许可。客户不得出于任何诊断或治疗目的或以任何与产品标示声明相冲突的方式使用任何产品。CST 销售或许可的产品提供给作为最终用户的客户,且仅用于研究和开发用途。出于诊断、预防或治疗目的任何产品使用或出于转售(单独或作为成分)或其他商业目的的任何产品购买都要求来自 CST 的单独许可。客户 (a) 不得向任何第三方出售、许可、出借、捐赠或另行转让或提供任何本公司产品,无论单独或联合其他材料方式,或使用本公司产品制造任何商业产品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反编译、反汇编或另行尝试发现本公司产品的底层结构或技术,或出于开发与 CST 产品或服务竞争的任何产品或服务的目的使用本公司产品,(c) 不得从本公司产品改变或移除任何商标、商品名称、徽标、专利或版权声明或标记,(d) 仅应根据 CST 产品销售条款和任何适用文档使用本公司产品,以及 (e) 应就客户联系本公司产品所用的任何第三方产品或服务而言遵守任何许可、服务条款或类似协议。