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FLT3 (BV10A4H2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
偶联抗体

FLT3 (BV10A4H2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #72144

应用

反应性 敏感性 MW (kDa) 同型
H 内源性 小鼠 IgG1
流式细胞术

使用 FLT3 (BV10A4H2) 小鼠单克隆抗体 (Alexa Fluor® 647 偶联物)(实线)或浓度匹配的小鼠 (MOPC-21) 单克隆抗体 IgG1 同型对照 (Alexa Fluor® 647 偶联物) #4843(虚线)对活的 K-562 细胞(蓝色)和 SEM 细胞(绿色)进行流式细胞分析。

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流式细胞术

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS):(#9808) 要配制 1 L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 到 950 ml dH2O 中,混合均匀。
  2. 孵育缓冲液:将 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 溶解于 100 ml 1X PBS 中。储存在 4°C。

B. 免疫染色

  1. 使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
  2. 将 0.5-1x106 细胞分装到每个测试管中(按容量)。
  3. 添加 2-3 ml 孵育缓冲液到每支试管,随后通过离心润洗。重复操作。
  4. 在 100 µl 稀释一抗(按照推荐的稀释比例在孵育缓冲液中配制)中重悬细胞。
  5. 室温孵育 1 小时。
  6. 通过离心分离用 2-3 ml 孵育缓冲液洗涤。
  7. 在相应量的 PBS 中重悬细胞,并在流式细胞分析仪上进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

实验步骤编号:1504

应用 稀释度
流式细胞术 1:50
存储:

保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。储存在 4°C。请不要分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

FLT3 (BV10A4H2) 小鼠单克隆抗体 (Alexa Fluor® 647 偶联物) 可检测 FLT3 内源总蛋白的水平。

物种反应性:

使用白血病细胞系 BV-173 对动物进行免疫接种来产生 BV10A4H2 克隆,使用蛋白G 色谱对组织培养上清液进行纯化而得到抗体。

Cell Signaling Technology 的这种抗体接合 Alexa Fluor® 647 荧光染料,并可对人体细胞进行直接的流式细胞分析内部检测。

FMS 相关酪氨酸激酶 3 (FLT3,也称作 Flk2),是酪氨酸激酶家族 III 型受体的一员,该家族还包括 c-Kit、PDGFR 和 M-CSF 受体。FLT3 在早期造血祖代细胞中表达并促进造血系统内细胞的生长和分化 (1,2)。FLT3 在结合其配体 FL 后被激活,从而导致酪氨酸自磷酸化和下游靶标酪氨酸磷酸化的级联反应 (3)。PI3 激酶的 p85 亚基、SHP2、GRB2 和 Shc 在 FL 激活后都与 FLT3 相关(4-6)。Tyr589/591 位于 FLT3 的近膜区并可能对 FLT3 酪氨酸激酶活性有重要调节作用。包含内部串联复制 (ITDs) 在内的 FLT3 体细胞突变发生在 20% 的急性髓性白血病患者身上 (7)。

  1. Shurin, M.R. et al. (1998) Cytokine Growth Factor Rev 9, 37-48.
  2. Naoe, T. et al. (2001) Cancer Chemother Pharmacol 48 Suppl 1, S27-30.
  3. Namikawa, R. et al. (1996) Stem Cells 14, 388-95.
  4. Beslu, N. et al. (1996) J Biol Chem 271, 20075-81.
  5. Zhang, S. and Broxmeyer, H.E. (2000) Biochem Biophys Res Commun 277, 195-9.
  6. Zhang, S. et al. (1999) J Leukoc Biol 65, 372-80.
  7. Mizuki, M. et al. (2000) Blood 96, 3907-14.
Entrez-Gene Id
2322
Swiss-Prot Acc.
P36888
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