Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
15956S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人
使用与人 COL11A1 蛋白中 Glu320 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
细胞外基质 (ECM) 是一种复杂的大分子网络,为基底膜和间质基质中的细胞提供结构组织支持。它由许多分子组成,包括蛋白、糖蛋白、蛋白聚糖和多糖 (1,2)。构成 ECM 和人体的主要蛋白质之一是胶原蛋白。胶原是蛋白的一个大家族。它们是由三条 α 多肽链组成的三聚体分子,其形成所有胶原特有的三链螺旋结构 (3)。胶原的大家族分为三个亚组:纤维胶原、非成纤维胶原以及纤维相关性胶原。这些亚组在其结构和超分子组装方面各不相同 (3)。
胶原 11A1 (COL11A1) 是一种微量的纤维胶原,除在软骨(高水平表达)和一些其他组织/器官(低水平表达)中外,在大部分正常组织中的表达水平通常都不高 (4)。 但是,据报道,对多种癌症(包括卵巢癌、结肠癌、乳腺癌、肺癌)数据的荟萃分析表明该分子的表达与晚期致癌疾病相关 (5)。此外,它还与上皮-间质细胞转换 (EMT) 和转移有关 (6,7)。癌症相关成纤维细胞 (CAF) 通常是许多实体瘤的基质细胞中最丰富的细胞类型。它们被认为促进了 ECM 硬度,最终被认为促进了肿瘤生长和对化疗干预的抗性。COL11A1 被发现在 CAF 中升高,并且可能会促进化疗抗性 (8)。
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