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11527
CD86/B7-2 (GL-1) Rat mAb (PE-Cy7® Conjugate)
偶联抗体

CD86/B7-2 (GL-1) Rat mAb (PE-Cy7® Conjugate) #11527

应用

反应性 敏感性 MW (kDa) 同型
M 内源性 大鼠 IgG2a、kappa
流式细胞术

使用 CD86/B7-2 (GL-1) 大鼠单克隆抗体 (PE-Cy7® 偶联物)(顶排)或浓度匹配的大鼠同型对照 (PE-Cy7® 偶联物)(底排)和共染料 CD19 (1D3) 大鼠单克隆抗体 (violetFluor™ 450 偶联物) #54508 对未经(左栏)或经 LPS #14011(500 ng/ml,3 天;右栏)处理的活的小鼠脾细胞进行流式细胞分析。

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流式细胞术

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS):(#9808) 要配制 1 L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 到 950 ml dH2O 中,混合均匀。
  2. 孵育缓冲液:将 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 溶解于 100 ml 1X PBS 中。储存在 4°C。

B. 免疫染色

  1. 使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
  2. 将 0.5-1x106 细胞分装到每个测试管中(按容量)。
  3. 添加 2-3 ml 孵育缓冲液到每支试管,随后通过离心润洗。重复操作。
  4. 在 100 µl 稀释一抗(按照推荐的稀释比例在孵育缓冲液中配制)中重悬细胞。
  5. 室温孵育 1 小时。
  6. 通过离心分离用 2-3 ml 孵育缓冲液洗涤。
  7. 在相应量的 PBS 中重悬细胞,并在流式细胞分析仪上进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

实验步骤编号:1504

为获得最佳的流式细胞术结果,我们建议每次检测使用 0.25 μg 抗体。可能存在少量沉淀物,但不会干扰抗体性能。如果存在沉淀物,则以 6000 g 的离心力对试管离心分离 10-30 秒钟。转移上清液到避光小瓶中。

应用 稀释度
流式细胞术 1:80
存储:

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶(pH 为 7.2)中。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 6 个月。请不要分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

CD86/B7-2 (GL-1) 大鼠单克隆抗体 (PE-Cy7® 偶联物) 可检测 内源水平的CD86/B7-2 总蛋白。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

小鼠

对组织培养上清液进行亲和层析纯化即可获得该单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 PE-Cy7®,并在内部对小鼠细胞进行了直接的流式细胞分析检测。

CD80 (B7-1, BB1) 和 CD86 (B7-2, B70) 是 B7 细胞表面配体家族的成员,可调节 T 细胞激活和免疫应答。CD80 在激活的抗原呈递细胞中表达,包括树突细胞、B 细胞、单核细胞和巨噬细胞。CD86 在休眠单核细胞、树突细胞、激活的 B 淋巴细胞中表达,在有炎症的情况下进一步上调 (1-3)。CD80 和 CD86 均为 CD28 的配体,CD28 是一种 T 细胞共刺激受体。CD28 与 CD80 或 CD86 的相互作用提供初始 T 细胞激活、T 细胞增殖以及获得效应子功能所需的第二信号 (3-7)。或者,CD80 和 CD86 还是 CTLA-4 的配体,这会导致 T 细胞活性下调 (3,7-9)。

GL-1 抗体被用作B 细胞、巨噬细胞和树突细胞上 CD86 表达的一种标记物。

  1. Freeman, G.J. et al. (1989) J Immunol 143, 2714-22.
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  9. Krummel, M.F. and Allison, J.P. (1995) J Exp Med 182, 459-65.
Entrez-Gene Id
12524
Swiss-Prot Acc.
P42082
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

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Cy 和 CyDye 是 GE Healthcare 的注册商标。
violetFluor 是 Tonbo Biosciences 的注册商标。

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