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76378
CD62L/L-Selectin (MEL-14) Rat mAb (FITC Conjugate)
偶联抗体

CD62L/L-Selectin (MEL-14) Rat mAb (FITC Conjugate) #76378

应用

反应性 敏感性 MW (kDa) 同型
M 内源性 大鼠 IgG2a、kappa
流式细胞术

以浓度匹配的大鼠同型对照 (FITC 偶联物)(左图)作为对照,使用 CD62L/L-Selectin (MEL-14) 大鼠单克隆抗体 (FITC 偶联物) 和共染料 CD44 (IM7) 大鼠单克隆抗体 (APC 偶联物) #53289(右图)对活的小鼠脾细胞进行流式细胞分析。

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流式细胞术

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS):(#9808) 要配制 1 L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 到 950 ml dH2O 中,混合均匀。
  2. 孵育缓冲液:将 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 溶解于 100 ml 1X PBS 中。储存在 4°C。

B. 免疫染色

  1. 使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
  2. 将 0.5-1x106 细胞分装到每个测试管中(按容量)。
  3. 添加 2-3 ml 孵育缓冲液到每支试管,随后通过离心润洗。重复操作。
  4. 在 100 µl 稀释一抗(按照推荐的稀释比例在孵育缓冲液中配制)中重悬细胞。
  5. 室温孵育 1 小时。
  6. 通过离心分离用 2-3 ml 孵育缓冲液洗涤。
  7. 在相应量的 PBS 中重悬细胞,并在流式细胞分析仪上进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

实验步骤编号:1504

为获得最佳的流式细胞术结果,我们建议每次检测使用 0.25μg 抗体。

应用 稀释度
流式细胞术 1:200
存储:

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶(pH 为 7.2)中。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 6 个月。请不要分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

CD62L/L-Selectin (MEL-14) 大鼠单克隆抗体 (FITC 偶联物) 可检测小鼠 内源水平的CD62L 总蛋白。

物种反应性:

小鼠

对组织培养上清液进行亲和层析纯化即可获得该单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 FITC,并在内部对小鼠细胞进行了直标流式细胞分析检测。

L 选择蛋白(CD62L、MEL-14、LAM1、SELL)是一种细胞黏附分子,负责复位和介导次级淋巴组织中淋巴细胞与高内皮小静脉 (HEV) 的结合 (1-5)。它是一种用于区分初始和记忆 T 细胞与效应 T 细胞的常见标记物 (6)。

  1. Gallatin, W.M. et al. Nature 304, 30-4.
  2. Tedder, T.F. et al. (1989) J Exp Med 170, 123-33.
  3. Tedder, T.F. et al. (1990) J Immunol 144, 532-40.
  4. Berg, E.L. et al. (1991) J Cell Biol 114, 343-9.
  5. Finger, E.B. et al. (1996) Nature 379, 266-9.
  6. Sallusto, F. et al. (1999) Nature 401, 708-12.
Entrez-Gene Id
20343
Swiss-Prot Acc.
P18337
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

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