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CD19 (1D3) Rat mAb (FITC Conjugate)
偶联抗体

CD19 (1D3) Rat mAb (FITC Conjugate) #53343

应用

反应性 敏感性 MW (kDa) 同型
M 内源性 大鼠 IgG2a、kappa
流式细胞术

以浓度匹配的大鼠同型对照 (FITC 偶联物)(虚线)作为对照,使用 CD19 (1D3) 大鼠单克隆抗体 (FITC 偶联物)(实线)对活的小鼠脾细胞进行流式细胞分析。

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流式细胞术

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS):(#9808) 要配制 1 L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 到 950 ml dH2O 中,混合均匀。
  2. 孵育缓冲液:将 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 溶解于 100 ml 1X PBS 中。储存在 4°C。

B. 免疫染色

  1. 使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
  2. 将 0.5-1x106 细胞分装到每个测试管中(按容量)。
  3. 添加 2-3 ml 孵育缓冲液到每支试管,随后通过离心润洗。重复操作。
  4. 在 100 µl 稀释一抗(按照推荐的稀释比例在孵育缓冲液中配制)中重悬细胞。
  5. 室温孵育 1 小时。
  6. 通过离心分离用 2-3 ml 孵育缓冲液洗涤。
  7. 在相应量的 PBS 中重悬细胞,并在流式细胞分析仪上进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

实验步骤编号:1504

为获得最佳的流式细胞术结果,我们建议每次检测使用 0.25 μg 抗体。

应用 稀释度
流式细胞术 1:200
存储:

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶(pH 为 7.2)中。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 6 个月。请不要分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

CD19 (1D3) 大鼠单克隆抗体 (FITC 偶联物) 可检测小鼠内源水平的CD19 总蛋白。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

小鼠

对组织培养上清液进行亲和层析纯化即可获得该单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 FITC,并在内部对小鼠细胞进行了直标流式细胞分析检测。

CD19 是一种 95 kDa 的共受体,它能在 B 细胞中放大信号转导级联反应 (1)。在 B 细胞的表面,CD19 与 CD21、CD81 和 Leu-13 结合并发挥其作用。CD19 的胞质尾区有 9 个保守的酪氨酸残基,这些残基通过将信号转导分子偶联到其受体上在 CD19 介导的功能中发挥重要作用 (1)。B 细胞受体或 CD19 连结后,CD19 的 Tyr531 和 Tyr500 位点被逐渐磷酸化。此磷酸化会使 PI3 激酶和 Src 家族的酪氨酸激酶偶联到 CD19 并激活 PI3K 和 Src 信号转导通路 (2,3)。B 细胞受体与 CD19 的共结合也促进了 CD19 中 Tyr409 位点的磷酸化。在这些位点的磷酸化也使得它能够结合 Vav 并介导增强的胞内钙反应和 JNK 信号通路 (4,5)。

1D3 克隆被广泛用作小鼠 B 细胞和树突细胞亚群表面上 CD19 表达的一种表型标记物。

  1. Tedder, T.F. et al. (1997) Immunity 6, 107-18.
  2. Buhl, A.M. and Cambier, J.C. (1999) J Immunol 162, 4438-46.
  3. Fujimoto, M. et al. (2000) Immunity 13, 47-57.
  4. O'Rourke, L.M. et al. (1998) Immunity 8, 635-45.
  5. Sato, S. et al. (1997) Proc Natl Acad Sci U S A 94, 13158-62.
Entrez-Gene Id
12478
Swiss-Prot Acc.
P25918
仅供研究使用。不得用于诊断流程。

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