对促销感兴趣? | 点击此处 >>
65583
ALDH1A1 (D9Q8E) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
偶联抗体

ALDH1A1 (D9Q8E) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate) #65583

Citations (1)
筛选器:
  1. F

使用 ALDH1A1 (D9Q8E) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate) 对 HeLa(蓝色)和 ACHN(绿色)细胞进行流式细胞分析。

购买 # 65583S
产品货号 规格 价格 库存
65583S
100 µl(50 次检测)

支持数据

反应性 H
敏感性 内源性
MW (kDa)
同型 兔 IgG

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体接合藻红蛋白 (PE),并可对人体细胞进行了直接的流式细胞术分析内部检测。该抗体的物种交叉反应性预计与非偶联的 ALDH1A1 (D9Q8E) XP® Rabbit mAb #54135 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术 1:50

存储:

保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。储存在 4°C。切勿分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

打印

查看 > 折叠 >

针对需甲醇通透的直标抗体的实验步骤(流式细胞术)

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS):(#9808) 要配制 1 L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 到 950 ml dH2O 中,混合均匀。
  2. 16‭‬% 甲醛(无甲醇)
  3. 100% 甲醇
  4. 孵育缓冲液:将 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 溶解于 100 ml 1X PBS 中。储存在 4°C。

B. 固定

注意:如果使用全血,则需在固定前裂解红细胞并通过离心洗涤。

  1. 通过离心收集细胞并吸除上清液。
  2. 在 0.5-1 ml 1 X PBS 中重悬细胞。添加甲醛并使其终浓度为 4%。
  3. 在室温下固定 15 分钟。
  4. 用足够的 1X PBS 离心洗涤。将上清液丢弃在合适的废液缸中。在 0.5-1 ml 1 X PBS 中重悬细胞。

C. 通透

  1. 通过温和涡旋混合情况下向预冷的细胞中缓慢添加冰冷的 100% 甲醇至 90​% 甲醇的终浓度,以通透细胞。
  2. 在冰上孵育 30 分钟。
  3. 继续进行细胞免疫染色(D 部分)或将细胞储存于 -20°C 的 90% 甲醇中。

D. 免疫染色

  1. 将所需数量的细胞分装进试管或加样孔中。
  2. 通过离心分离,用足够的 1X PBS 洗涤以清除甲醇。将上清液丢弃在合适的废液缸中。如有必要,可重复进行。
  3. 在 100 µl 稀释的直标抗体(按照建议的稀释度在孵育缓冲液中制备)中重悬细胞。
  4. 室温孵育 1 小时。避光保存。
  5. 通过离心分离,用孵育缓冲液洗涤。丢弃上清液。重复操作。
  6. 在 1X PBS 中重悬细胞并用流式细胞分析仪进行分析;或者,如要进行 DNA 染色,那么继续进行可选的 DNA 染色(参见 E 部分)。

E. 可选 DNA 染料

  1. 在 0.5 ml 的 DNA 染料(例如 Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087)中重悬细胞。
  2. 室温孵育至少 5 分钟。
  3. 用流式细胞术分析 DNA 染色液中的细胞。

发布​于 2009 年 7 月 

修订于 2017 年 6 月

实验步骤编号:407

特异性/敏感性

ALDH1A1 (D9Q8E) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate) 可识别内源水平的 ALDH1A1 总蛋白。

物种反应性:

来源/纯化

使用与人 ALDH1A1 蛋白羧基末端附近残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

醛脱氢酶家族是一个大型酶家族,可将代谢过程中形成的乙醛氧化成羧酸 (1)。ALDH1A1 是乙醛脱氢酶在肝细胞质中的同工型,与乙醇脱氢酶共同在乙醇代谢的主要通路中发挥作用 (2)。ALDH1A1 也称视黄醛脱氢酶 1,参与视黄醇代谢,将视黄醇转化为视黄酸 (3)。近期研究表明,通过 ALDH1A1 控制视黄醇信号转导,可能会影响造血干细胞的分化 (4)。目前,ALDH1 同工型作为预测疾病的生物标记物引起了广泛关注。许多研究表明,ALDH1A1 是一种潜在的癌症干细胞标志物,对多种肿瘤类型具有药物抗性,如黑色素瘤 (5)、肺癌 (6) 和恶性胶质瘤 (7)。

  1. Jackson, B. et al. (2011) Hum Genomics 5, 283-303.
  2. Edenberg, H.J. (2007) Alcohol Res Health 30, 5-13.
  3. Duester, G. (2000) Eur J Biochem 267, 4315-24.
  4. Chute, J.P. et al. (2006) Proc Natl Acad Sci U S A 103, 11707-12.
  5. Luo, Y. et al. (2012) Stem Cells 30, 2100-13.
  6. Huang, C.P. et al. (2013) Cancer Lett 328, 144-51.
  7. Schäfer, A. et al. (2012) Neuro Oncol 14, 1452-64.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
XP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。

Powered By OneLink