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定制偶联服务

需要目录中没有的偶联抗体?我们可以为您进行偶联。

  • 使用目录中提供的相同偶联抗体标准验证、优化并测试稳定性
  • 节省时间,避免与自制试剂盒相关的缺陷
  • 需要亲自验证偶联抗体?我们还提供更加快捷经济的基础偶联服务

联系我们了解更多信息。

提供的偶联服务:

偶联类型:示例 服务级别 服务包括
荧光基团 I 型:Alexa Fluor®、Cyanine (CyDye®) 和 Pacific Blue 染料 基础 偶联 + 清除游离染料
I 级 标记程度 (DOL) + 基础服务
II 级 验证 1 + I 级服务
III 级 稳定性测试 + II 级服务
荧光基团 II 型:Phycoerythrin (PE)、PE-CyDye® 串联(例如 PE-Cy®7)和别藻蓝素 (APC) 基础 偶联 + 纯化
I 级 验证 1 + 基础服务
II 级 稳定性测试 + I 级服务
半抗原:生物素、地高辛 (DIG)、二硝基酚 (DNP) 和丹磺酰 基础 偶联 + 清除游离生物素
I 级 验证2 + 基础服务
微珠:Sepharose® 和磁珠 基础 偶联 + 清除游离抗体
I 级 验证3 + 基础服务
酶:辣根过氧化物酶 (HRP) 基础 偶联 + 纯化
I 级 验证2 + 基础服务
  • 1 标准验证应用方法是流式细胞术。备选方法可能会延长时间线,价格更高。
  • 2 标准验证应用方法是蛋白质印迹法。备选方法可能会延长时间线,价格更高。
  • 3 标准验证应用方法是免疫沉淀法。备选方法可能会延长时间线,价格更高。
  • 灵活性:分级选项系列包括基础抗体偶联、偶联物的完全验证和稳定性测试
  • 验证:偶联物在关键应用中使用生物学相关的细胞系统和对照进行测试,并使用排阻色谱法验证物理完整性
  • 优化:服务选项包括选择偶联化学物、清除游离染料和/或抗体纯化以及检测最佳标记程度 (DOL),以确保信噪比最佳
  • 支持:负责生产和验证我们市售的抗体偶联物的科学家会提供应用咨询和广泛的技术支持

DIY 偶联试剂盒理论上看似不错,但是否物有所值?非最佳标记、干扰特异性和/或不稳定/降解导致的效率低下会对性能造成负面影响。另一个缺点:在偶联步骤中抗体丢失意味着结束时获得的功能性抗体远少于起始。

通过 Cell Signaling Technology (CST) 的定制偶联服务,您可以避免这些耗时的陷阱,并且获得您所支付的全部抗体。

PE 偶联抗体在流式细胞术中的对比

18-WFO-15801 PE 偶联抗体在流式图中的对比

使用 CST 定制偶联方法(蓝色)或竞争对手 DIY PE 偶联试剂盒(绿色)进行 Helios (D8W4X) XP® 兔单克隆抗体的 PE 偶联对比。 低表达细胞系 RL-7(虚线)和高表达细胞系 Jurkat(实线)的流式细胞术分析。计算得到的信噪比如下所示(下图)。

HRP 偶联抗体在 ELISA 中的对比

18-WFO-15801 DIY ELISA 对比数据-v.3

使用 CST 定制偶联方法(蓝色)或竞争对手 DIY HRP 偶联试剂盒(绿色)进行磷酸化 Akt (Ser473) (193H12) 兔单克隆抗体的 HRP 偶联在 ELISA 分析中的对比。未经处理(虚线)或已经人胰岛素样生长因子 I 处理(实线)的 MCF7 细胞的裂解物蛋白浓度与在 450 nm 处的吸光度之间的关系如图所示(左图)。在 0.625 mg/ml 裂解物浓度时计算信噪比(右图)。

HRP 偶联抗体在蛋白质印迹中的对比

18-WFO-15801-HRP 偶联抗体在蛋白质印迹中的对比-v.2

使用 CST 偶联方法或竞争对手 DIY HRP 偶联试剂盒进行 GAPDH (D16H11) XP® 兔单克隆抗体的 HRP 偶联对比。使用浓度匹配的抗体偶联物,对 C6 和 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。这些数据表明,采用 CST 定制偶联能保持更好的信号特异性。

以下数据显示了 CST 偶联抗体在多种应用中的性能。注意,以下所示的抗体均为市售现成产品;同一科学家团队还会偶联和验证现成和定制产品。

流式细胞术

对人外周血单核细胞进行流式细胞分析

使用 Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate) #16318(顶行)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (PE Conjugate) #5742(底行)对未经处理(左栏)或已经交联抗 CD3 和抗 CD28(各 10 µg/ml,15 分钟;右栏)处理并经 CD3 抗体共染色的人外周血单核细胞进行流式细胞分析。

 

对 PC-3 细胞进行流式细胞分析

使用 TNFRSF8/CD30 (E7E4D) XP® 兔单克隆抗体(Alexa Fluor® 594 偶联物)(实线)或浓度匹配的兔 (DA1E) 单克隆抗体 IgG XP® 同型对照(Alexa Fluor® 594 偶联物)(虚线)对 HeLa 细胞(蓝色)和 KARPAS-299 细胞(绿色)进行流式细胞分析。KARPAS 细胞系来源:剑桥大学 Abraham Karpas 博士。

蛋白质印迹法

对 HeLa 细胞的 NF-κB Control Cell Extracts #9243 进行蛋白质印迹分析

使用 Phospho-NF-κB p65 (Ser536) (93H1) Rabbit mAb (Biotinylated) #4025 对未经处理 (-) 或已经 hTNF-α #8902(20 ng/ml,5 分钟,+)处理的 HeLa 细胞的 NF-κB Control Cell Extracts #9243 进行蛋白质印迹分析。

免疫荧光法

对小鼠脑细胞进行共聚焦免疫荧光分析

使用 NeuN (D4G4O) XP® (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #54761(绿色)对小鼠脑细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DyLight 554 Phalloidin #13054(红色)标记。

对小鼠原代骨髓源性巨噬细胞或 BMDM 进行共聚焦免疫荧光分析

使用 ASC (D2W8U) Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa® 488 Conjugate) #17507(绿色)对用 mM-CSF (20 ng/mL,8 天)分化,随后用 LPS (50 ng/mL,过夜,左图)或 LPS(50 ng/mL;过夜)处理后再用 Nigericin(10 uM,2 小时;右图)处理的小鼠原代骨髓源性巨噬细胞 (BMDM) 进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。注意,用 LPS 和 Nigericin 刺激后 ASC 转位到炎性小体(白色箭头)。

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