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CST 科学家发表了磷酸化蛋白质组研究的结果

Cell Signaling Technology 科学家研究癌细胞系中的 Akt-RSK-S6 激酶信号转导网络并在期刊《科学信号转导》中发表了结果

Cell Signaling Technology (CST) 位点发现小组科学家目前在期刊《科学信号转导》中发表了一篇文章 ( Moritz, A. et al. 2010. Sci Signal. 3, ra64)。研究旨在回答一些最基本的细胞生物学问题 — 诱发癌细胞生长和存活的因素有哪些?以及我们能使用靶抑制剂来让肿瘤停止生长吗?这项研究的结果可提供有关在肺癌细胞中发现的异常信号转导机制的信息,并检测潜在治疗药物靶标,并可能帮助预测对患有疾病的患者的疗法。

受体酪氨酸激酶 ( RTK) 是一类信号转导分子,会在许多形式的癌细胞中促进肿瘤细胞生长和存活,有时称为致癌诱导物。在 RTK 的下游,有多种核心信号转导通路,通常会负责癌细胞生长和存活;这些通路包括 PI3K/Akt、MAPK 和 mTOR 通路。所有这些通路会激活 AGC 激酶家族成员,包括 Akt、RSK 和 p70 S6 激酶,它们的蛋白质底物在 RxRxxS/T 基序上被磷酸化。之前,未对这些丝氨酸/苏氨酸激酶进行大规模的磷酸化蛋白质组分析,因为存在精氨酸富集基序序列特定的技术难题。

听与资深作者 Michael Comb 博士的会谈,因为他谈到《科学信号转导》播客中这篇文章的结果。

下载播客。

这个研究使用三种之前描述的非小细胞肺癌 (NSCLC) 细胞系,在这些细胞系中,以下三种不同 RTK 中的一种会促进癌细胞生长和存活:EGFR、c-Met 或 PDGFR。该实验方法涉及使用 PhosphoScan®,这是 CST 用于抗体肽富集的专有方法,同时结合使用串联质谱方法,以对翻译后修饰进行定量分析。一个关键步骤是开发 RxRxxS/T Motif Antibody,随后将其用作亲和力试剂来选择性对 Akt、RSK 和 p70 S6 激酶的磷酸化底物进行免疫沉淀。使用各种 RTK 抑制剂以及对 PI3K、MEK 和 mTOR 有特异性的抑制剂,可对这些 RTK 的下游信号转导网络进行比对。已检测到超过 300 种已知和新型底物,包括与支架、蛋白质稳定性、代谢、转运和迁移有关的蛋白(见下文结果图)。

Akt-RSK-S6 激酶信号转导通路

如需了解更多信息,请访问 PhosphoSitePlus ®,这是 CST 的人工建构的翻译后修饰资源,在 www.phosphosite.org 上提供,这个网站提供所有有关在研究中发现的已观察底物磷酸化的信息。

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