对促销感兴趣? | 点击此处 >>

ALK 和 ROS1 - 癌细胞中的疾病驱动蛋白

间变性淋巴瘤激酶 (ALK) 和 c-ros 癌基因 1 (ROS1) 是相关的受体酪氨酸激酶 (RTK)。研究发现,ALK 和 ROS 是在各种癌细胞中表达的突变羧基末端融合蛋白 (1-10)。表 1 列出了一些已检测到的 ALK 和 ROS1 融合伴侣以及相关的癌症类型。

ALK / ROS1 通路
RTK 抑制剂 融合伴侣 相关癌症
ALK Crizotinib5 EML42,11, TFG1, KIF5B6, NPM7 NSCLC1,2, ALCL7, CRC11
ROS1 Crizotinib5 FIG8, CD749, SLC34A29,11 恶性胶质瘤8、胆管癌10、卵巢癌3、NSCLC1,4、CRC11

表 1. ALK 和 ROS1 融合伴侣以及相关癌症的汇总表。缩略语:  ALCL = 间变性大细胞淋巴瘤;EML4 = 棘皮动物微管相关蛋白样 4;NPM = 核仁磷蛋白;NSCLC = 非小细胞肺癌;TFG = TRK 融合基因

 

  1. Rikova, K. et al. (2007) Cell 131, 1190–1203.
  2. Takeuchi, K. et al. (2008) Clin Cancer Res 14, 6618–6624.
  3. Birch, A.H. et al. (2011) PLoS One 6, e28250.
  4. Rimkunas, V.M. et al. (2012) Clin Cancer Res 18, 4449–4457.
  5. D’Arcangelo, M. et al. (2013) Curr Opin Oncol 25, 121–129.
  6. Takeuchi, K. et al. (2009) Clin Cancer Res 15, 3143–3149.
  7. Morris, S.W. et al. (1994) Science 263, 1281–1284.
  8. Charest, A. et al. (2003) Genes Chromosomes Cancer 37, 58–71.
  9. Stumpfova, M. and Jänne, P.A. (2012) Clin Cancer Res 18, 4222–4224.
  10. Gu, T.L. et al. (2011) PLoS One 6, e15640.
  11. Aisner, D.L. et al (2013) Mol Cancer Res (Epub ahead of print)

Cell Signaling Technology 建议使用两种高度敏感的抗体来检测 ALK 和 ROS1 全长蛋白及羧基末端融合蛋白。

功能和优势:

  • 羧基末端表位 – 能够检测全长蛋白和羧基末端融合癌蛋白。
  • 高度敏感的抗体 – 能够检测 ROS1 或 ALK 的内源水平。
  • 与其他家族成员无交叉反应性 – 确保特异性检测 ROS1 或 ALK 蛋白。
  • 兔单克隆抗体 – CST 的专有 XMT® 技术可用于对相关应用仔细选择抗体。

ROS1 (D4D6) Rabbit mAb #3287 IHC-P(石蜡)

3287 IHC

使用 ROS1 (D4D6) Rabbit mAb #3287 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。注:对 FIG-ROS1 融合蛋白进行染色 (4)。

3287 WB

使用 ROS1 (D4D6) Rabbit mAb #3287(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对 HCC78 (SLC34A2-ROS1)、U-118 MG (FIG-ROS1) 和 HeLa(ROS1 阴性)细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。注:HCC78 细胞表达 85、70 和 59 kDa 形式的 SLC34A2-ROS1 融合蛋白 (1)。

ALK (D5F3) XP® Rabbit mAb #3633 IHC-P(石蜡)

3633 IHC

使用 ALK (D5F3) XP® Rabbit mAb #3633 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。

3633 WB

使用 ALK (D5F3) XP® Rabbit mAb #3633 对 NCI-H2228 和 NCI-H3122 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。有必要显示融合不同 EML4 外显子(v1 或 v3)的变体。

访问我们的产品页,了解更多信息和其他验证数据:

步骤 1

CST 使用 PTMScan® 技术对肺癌细胞中的酪氨酸激酶活性进行了一次大规模的无偏调查。Cell Signaling Technology(11) 开发的这项专有技术利用 CST™ 基序抗体和 LC 串联质谱法,抗体用于对消化细胞提取物的肽进行免疫亲和纯化,质谱法用来检测和定量磷酸化、乙酰化或泛素化等翻译后修饰所发生的变化。对于这项研究中,我们使用磷酸化酪氨酸基序抗体,来分析 NSCLC 细胞系和组织中蛋白酶体内的磷酸化变化。

PTMScan 流程图

步骤 2

通过使用 PTMScan® 技术,我们调查了 41 种 NSCLC 细胞系和 150 余种 NSCLC 肿瘤细胞中受体酪氨酸激酶 (RTK) 和非受体酪氨酸激酶的磷酸化酪氨酸状态。我们发现 50 余种酪氨酸激酶和 2,500 余种下游底物在 NSCLC 生长和进展中发挥作用。这项研究的两个非常令人激动的发现为:在某些 NSCLC 细胞系和肿瘤细胞中检测到新的间变性淋巴瘤激酶 (ALK) 和 c-ros 癌基因 1 (ROS1) 羧基末端融合蛋白。

PTMScan 流程图

步骤 3

对 ALK 和 ROS1 具有特异性的兔单克隆抗体 [ALK (D5F3) XP® 兔单克隆抗体 #3633ROS1 (D4D6) 兔单克隆抗体 #3287] 已被开发用来检测全长和羧基末端融合蛋白。这些抗体已经 IHC 验证,并且可检测 NSCLC 样品中的 ALK 和 ROS1 融合蛋白表达 124)。

ALK IHC

使用 ROS1 (D4D6) Rabbit mAb #3287 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行 IHC 分析。注:对 FIG-ROS1 融合蛋白进行染色 (4)

步骤 4

CST 与 Pfizer, Inc.(ALK 抑制剂 crizotinib 的制造商)和 Ventana Medical Systems, Inc.(配套诊断检测的领先供应商)建立了合作伙伴关系,以共同开发在自动化诊断 IHC 筛选测定法中使用的 ALK (D5F3) XP® 兔单克隆抗体,这种抗体可检测 NSCLC 患者样品中的 ALK 融合蛋白。

ALK 表达染色呈阳性的患者样品可能成为 crizotinib 候选适用人,其中,crizotinib 于 2011 年 8 月在美国获批使用。

ALK IHC

使用 ALK (D5F3) XP® Rabbit mAb #3633 对高水平(上图)与低水平(下图)ALK 表达的石蜡包埋的人肺癌细胞进行 IHC 分析。

CST 科学家用粗体显示

2012

2011

2010

2009

2008

  • Guo A, Villén J, Kornhauser J, Lee KA, Stokes MP, Rikova K, Possemato A, Nardone J, Innocenti G,Wetzel R,Wang Y, MacNeill J, Mitchell J, Gygi SP, Rush J, Polakiewicz RD, Comb MJ (2008) Signaling networks assembled by oncogenic EGFR and c-Met. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105(2), 692-7.

2007

2005

2004

2002

Powered By OneLink