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我该使用多少抗体来进行 ChIP 实验?

 

抗体并不总是越多越好! 在这个由 Fang 主讲的 Tech Tips 视频中,了解使用的抗体量会如何影响您的染色质免疫沉淀 (ChIP) 结果。

在一次 ChIP 实验中使用的最佳抗体量根据抗体的亲和力、敏感性和特异性而有所不同。抗体并不总是越多越好 —— 抗体过多或过少都会降低 ChIP 信号。对于多数经 ChIP 验证的抗体,在 ChIP 实验中,0.5–2 µg 的抗体能产生一个理想的信噪比。此外,非常重要的是维持抗体量与染色质量的比率,而不是抗体量与 IP 体积的比率。对于 IgG 等对照抗体而言,您应该使用与您的检测抗体相同的量,以便进行公平比较。

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