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固定化金属亲和色谱 (IMAC) 服务

在 LC-MS/MS 之前,固定化金属亲和色谱 (IMAC) 是另一种用于使磷酸肽富集的策略。它使用带正电荷的离子(通常是 Fe3+)捕获带负电荷的磷酸肽。

比较 PTMScan® 抗体和 IMAC 磷酸肽富集:对人胃癌 (MKN-45) 细胞进行 PTM 分析。

使用各类基序/PTM 抗体(酪氨酸、脯氨酸、丝氨酸/苏氨酸和嗜碱性抗体)或 IMAC 方法对磷酸肽进行富集。

  • 在所有样品中检测到超过 20,000 个磷酸化位点。
  • 与 IMAC 方法相比,使用抗体所富集的磷酸肽之间的重叠最少。
  • 这些方法的互补性很强。要获得最佳的磷酸化蛋白质组覆盖范围,建议使用同时使用抗体和 IMAC 方法。
使用了基序抗体组合来使磷酸肽富集。

如所示,使用基序抗体组合来使 MKN-45 细胞中的磷酸肽富集 (A)。使用抗体和 IMAC 对 MKN-45 细胞中的磷酸肽进行富集所出现的重叠情况见面积比例文氏图。根据独特蛋白/位点进行比较 (B)。

查看完整数据集,这些数据集显示了抗体与 IMAC 富集法之间的互补性。

请咨询 IMAC 服务。

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