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CST 抗体验证原则

在Cell Signaling Technology,我们知道,单一的检测方法无法确定抗体的有效性。确认某免疫试剂具有足够的特异性和敏感性取决于使用的应用方法和实验步骤、所分析样品的类型和质量,以及抗体本身的固有生物物理特性。

为确保我们的抗体在您的实验中有效,我们坚持抗体验证标志,它涵盖六个互补的策略,用来确定任何给定检测中抗体的功能性、特异性、敏感性。CST 采用了 Uhlen 等人的工作,(“抗体验证方案”。Nature Methods (2016)),以构建抗体验证标志,这基于我们数十年的抗体制造商经验,以及我们对可重复科学的贡献。

CST 抗体验证标志

我们通过仔细调整适合每个产品的验证策略组合来保证我们的抗体能够符合要求。这意味着根据靶标的生物作用,定制我们的验证过程,考虑下游检测的敏感性要求,相应测试模型的可用性,以及每种方法与靶标研究的相关性。

标志策略

描述

二元模型: 在已知存在/不存在靶标信号的模型系统中测量抗体信号。包括野生型与基因敲除,靶向诱导或沉默。
表达范围: 在靶标表达水平有一定连续性的细胞系或组织中检测抗体信号强度。包括 siRNA 和杂合敲除试验。
正交数据: 在使用不依赖抗体的测定法测定的模型系统中,抗体信号与靶标表达相关。包括质谱分析和原位杂交。
多种抗体: 将抗体信号与使用针对靶标非重叠表位的抗体所观察到的信号进行比较。包括免疫沉淀、ChIP 和 ChIP-SEQ。
异源表达: 天然(或突变)靶蛋白异源表达后,在细胞系中评估抗体信号。
补充分析: 抗体特异性可以使用互补测定法来验证。包括竞争性 ELISA、肽斑点印迹、肽封闭或蛋白质阵列。
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