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弥漫性内生性脑桥胶质瘤 (DIPG)

癌性组蛋白是具有致癌特征的突变组蛋白,可影响染色质总体特征,并驱动基因表达改变引起的肿瘤发生。78% 的弥漫性内生性脑桥胶质瘤 (DIPG) 含有一个组蛋白 H3 癌性组蛋白,其中 Lys 27 因错义突变被替代为蛋氨酸,影响其被甲基化的能力并抑制基因表达。

从这些靶点开始

H3K27M

H3K27M 是一种癌性组蛋白,该蛋白中的突变导致肿瘤发展,其原因是 Ezh2 不再能够甲基化组蛋白以及基因表达异常上调。

DIPG 图 1

使用 Histone H3 (K27M Mutant Specific) (D3B5T) Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色),对含敲入带 FLAG 标签的 K27M 突变体组蛋白 H3.3 基因(左图,阳性)或敲入带 FLAG 标签的野生型组蛋白 H3.3 基因(中间,阴性)的小鼠星形胶质细胞和 HeLa 细胞(右图,阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。

Ezh2

H3K27 甲基化改变主要是因为基因组中的 Ezh2 错位,可通过 ChIP-seq 分析予以确认。

产品
Ezh2 (D2C9) XP® 兔单克隆抗体 #5246 – WB、IP、IF、F、IHC、ChIP、ChIP-seq
DIPG 图 2

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对 HeLa 细胞中提取的交联染色质,在加入 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 或 Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-Seq DNA Library Prep Kit for Illumina®#56795从 5ng 富集 ChIP DNA 中制备出用于 EZH2 ChIP-seq 的 DNA 文库,并从 50ng 富集的 ChIP DNA 中制备出用于 H3K27me3 ChIP-seq 的 DNA 文库,并使用 Illumina NextSeq 测序。已发现 EZH2 和 H3K27me3 在染色质中相互结合。该图显示了 EZH2 和 H3K27me3 在 MYT1 基因中的结合。

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