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细胞增殖概述

细胞增殖是指细胞分裂(细胞质分裂)引起的细胞数量增加,是细胞周期的最后一步。细胞增殖在生命周期中正常组织发育和维持是必须的。

细胞增殖是一个严格调控的过程,许多不同的蛋白质控制着细胞周期检查点。在癌细胞中发现的基因突变会导致不受控制的细胞增殖。

如何测量细胞增殖

细胞周期 由多个阶段组成,包括细胞大小增加的 G1 期、新合成 DNA 的 S 期、细胞进一步生长的 G2 期,最后是细胞最终分裂的 M 期或有丝分裂期。一些细胞退出细胞周期并停止分裂;这称为静止或静息状态 (G0)

细胞周期各阶段

细胞周期各阶段:G1 - 大小增加;S - DNA 合成和复制;G2 - 生长;M - 有丝分裂和细胞分裂;G0 - 休眠期。

测量细胞增殖的两种最常见方法包括细胞周期分析和增殖分析,取决于在 DNA 掺入丙啶 碘化丙啶BrdU

测定法 测量内容

细胞周期测定染料

碘化丙啶

7-AAD

基于其 DNA 的特征量化细胞周期不同阶段的细胞数。
Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087

Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087:使用 Phospho-Histone H3 (Ser10) Antibody (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #9708 和 Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution 对未经处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析(DNA 含量)。

BrdU Cell Proliferation Assay Kit

测量细胞增殖期间发生的 DNA 合成水平
BrdU Cell Proliferation Assay Kit #6813:

BrdU Cell Proliferation Assay Kit #6813:C2C12 细胞按不同密度接种在 96 孔板的无血清培养基中,并孵育过夜。按不同浓度往平板上添加血清,并孵育细胞 24 小时。最后,往平板中加入 10 μM BrdU,并孵育细胞 4 小时。

确定细胞增殖的标记物

另一种用于测量细胞增殖的常见方法是检查细胞周期蛋白以及增殖所需的其他蛋白的表达水平。增殖细胞的一些常见蛋白标记物包括:

增殖标记物 增殖标记物描述
增殖细胞核抗原 (PNCA) 在 DNA 复制中起重要作用的滑动 DNA 夹蛋白
PCNA (D3H8P) XP<sup>®</sup> Rabbit mAb #13110

PCNA (D3H8P) XP® Rabbit mAb #1311:使用 PCNA (D3H8P) XP® Rabbit mAb (绿色)和 β-Catenin (L54E2) Mouse mAb (IF Preferred) #2677(红色)对显示肠隐窝中增殖细胞染色的大鼠小肠细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Ki-67 仅在增殖细胞中高水平表达的非核组蛋白
Ki-67 (D2H10) Rabbit mAb (IHC Specific) #9027

Ki-67 (D2H10) Rabbit mAb (IHC Specific) #9027:使用 Ki-67 (D2H10) Rabbit mAb (IHC Specific) 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。

磷酸化组蛋白 H3 在增殖细胞中磷酸化的核组蛋白
Phospho-Histone H3 (Ser10) (D7N8E) XP<sup>®</sup> Rabbit mAb #53348

Phospho-Histone H3 (Ser10) (D7N8E) XP® Rabbit mAb #53348:使用 Phospho-Histone H3 (Ser10) (D7N8E) XP® Rabbit mAb (上图) 或 Histone H3 (D1H2) Rabbit mAb #4499 (下图),对未经处理的或经 Nocodazole #2190 (100ng/ml,16小时) 处理的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。该抗体的磷酸特异性的显示是进一步使用 λ-磷酸酶处理细胞裂解物。

β-半乳糖苷酶活性 β-半乳糖苷酶活性与不增殖的衰老细胞有关
Senescence β-Galactosidase Staining Kit #9860:

Senescence β-Galactosidase Staining Kit #9860:pH 为 6 时,对细胞群倍增数为 36(右图)的衰老 WI38 细胞进行 β-半乳糖苷酶染色。

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