Cell Signaling Technology

Cyclic AMP 和 GMP XP® 分析试剂盒

Cell Signaling Technology®现在提供Cyclic AMP 和 Cyclic GMP XP® 分析试剂盒(#4339 #4360),这是基于竞争免疫分析原理,用于测定许多G蛋白偶联受体(GPCRs)的活性。在这些试剂盒中,样品中的环核苷酸与试剂盒中提供的固定量的结合有HRP的环核苷酸竞争结合预包被在分析板上的特异性环核苷酸XP® 兔单抗。因为这个实验的竞争性本质,吸光度的大小与样品中的环核苷酸量成反比。

  • 试剂盒中使用最高质量的XP® monoclonal antibodies,以确保最高的灵敏度和特异性。
  • 技术支持由设计和使用并且最了解这些产品的科学家提供。

Cyclic Rendering

 

Cyclic GMP XP® Assay Kit #4360

Cell-based Assay example of Cyclic GMP XP Assay Kit #4360

Cyclic Nucleotide EIA Kits

No. Name
8020 Cyclic GMP XP® Chemiluminescent Assay Kit
4360 Cyclic GMP XP® Assay Kit
8019 Cyclic AMP XP® Chemiluminescent Assay Kit
4339 Cyclic AMP XP® Assay Kit

图1.细胞水平测定:用硝普化钠(SNP) 处理RFL-6细胞,用Cyclic GMP XP® Assay Kit #4360检测到cGMP浓度增加了。RFL-6细胞接种在12孔板上,2x105个细胞/孔,培养过夜。细胞在用SNP处理(30分钟)后,不处理或用0.5 mM IBMX预处理15分钟并用1XCell Lysis Buffer #9803裂解。图中为吸光度值(左)和活性百分比(右)。活性百分比计算如下:% 活性=100x[(A-Abasal)/(Amax-Abasal)],A代表样品的吸光度,Amax 是最大刺激下的吸光度(例如,高SNP浓度),Abasal是基本水平下的吸光度(没有SNP)。SNP是一个一氧化氮供体,直接激发可溶的鸟苷酸环化酶并增加细胞cGMP浓度。IBMX是促进细胞内cAMP 和 cGMP积累的cAMP 和 cGMP磷酸二酯酶的非特异性抑制剂。

Cyclic AMP XP® Assay Kit #4339

Cell-based Assay example of Cyclic AMP XP Assay Kit #4339

 

 

 

         

图2.细胞水平测定:用异丙肾上腺素处理293细胞,用Cyclic AMP XP® Assay Kit #4339检测到cAMP浓度增加了。293细胞接种在96孔板上,3x104个细胞/孔,培养过夜。细胞用0.5 mM IBMX预处理30分钟后,再用异丙肾上腺素处理(3分钟)前,并用1X Cell Lysis Buffer #9803裂解。图中为吸光度值(左)和活性百分比(右)。活性百分比计算如下:% 活性=100x[(A-Abasal)/(Amax-Abasal)],A代表样品的吸光度,Amax 是最大刺激下的吸光度(例如,高SNP浓度),Abasal是基本水平下的吸光度(没有SNP)。异丙肾上腺素是β-受体激动剂,能够激活293细胞内表达的beta-2肾上腺素能受体(ADRB2)。ADRB2的激活进而导致腺苷酸环化酶的激活以及第二信使cAMP的合成。

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