Cell Signaling Technology

产品通路——干细胞和谱系标记

StemLight™ Pluripotency Antibody Kit #9656

No. Size Price
9656S 1 Kit ( 100 tests ) ¥ 7893.0
Kit Includes Quantity Applications Dilution Isotype
Oct-4A (C30A3) Rabbit mAb 100 tests IF-IC 1:200 Rabbit IgG
Sox2 (D6D9) Rabbit mAb 100 tests IF-IC 1:200 Rabbit IgG
Nanog Antibody 100 tests IF-IC 1:200 Rabbit IgG
SSEA4 (MC813) Mouse mAb 100 tests IF-IC 1:200 Mouse IgG3
TRA-1-60(S) (TRA-1-60(S)) Mouse mAb 100 tests IF-IC 1:200 Mouse IgM
TRA-1-81 (TRA-1-81) Mouse mAb 100 tests IF-IC 1:200 Mouse IgM

应用::  IF-IC=免疫荧光(免疫细胞化学)

IF-IC

IF-IC

人类iPS细胞的共聚焦图像,使用的抗体是TRA-1-60(S) (TRA-1-60(S)) Mouse mAb(绿色,左上),TRA-1-81 (TRA-1-81) Mouse mAb(绿色,中上),SSEA4 (MC813) Mouse mAb(绿色,右上),Oct-4A (C30A3) Rabbit mAb(绿色,左下),Sox2 (D6D9) XP® Rabbit mAb(绿色,中下)和Nanog抗体(绿色,右下)。肌动蛋白微丝用DY-554 phalloidin(红色)标记。蓝色伪彩= DRAQ5® #4084(DNA荧光染料)。

IF-IC

IF-IC

NTERA-2细胞的共聚焦免疫荧光分析,左列未处理,右列视黄酸处理(10µM全反式视黄酸处理5天),使用的抗体是TRA-1-60(S) (TRA-1-60(S)) Mouse mAb(绿色, 上方),TRA-1-81 (TRA-1-81) Mouse mAb(绿色,中间)和 SSEA4 (MC813) Mouse mAb(绿色,下方)。肌动蛋白微丝用DY-554 phalloidin(红色)标记。蓝色伪彩= DRAQ5® #4084(DNA荧光染料)。视黄酸处理后随着神经元谱系的细胞分化,多能性标记物(绿色)丢失。

IF-IC

IF-IC

NTERA-2细胞的共聚焦免疫荧光分析,左列未处理,右列视黄酸处理(10µM全反式视黄酸处理14天),使用的抗体是Oct-4A (C30A3) Rabbit mAb(绿色, 上方),Sox2 (D6D9) XP® Rabbit mAb(绿色,中间)和Nanog抗体(绿色, 下方)。肌动蛋白微丝用DY-554 phalloidin(红色)标记。视黄酸处理后随着神经元谱系的细胞分化,多能性标记物(绿色)丢失。


IF-IC


NTERA-2细胞的共聚焦免疫荧光分析,左列未处理,右列视黄酸处理(10µM全反式视黄酸处理5天),使用的抗体是Neurofilament-L(C28E10)Rabbit mAb #2837(绿色, 上方)和 β3-Tubulin(TU-20)Mouse mAb #4466(绿色, 下方)。肌动蛋白微丝用DY-554 phalloidin(红色)标记。蓝色伪彩= DRAQ5® #4084(DNA荧光染料)。视黄酸处理后随着神经元谱系的细胞分化,神经元的标志物和结构出现

描述

StemLight™ Pluripotency Antibody Kit 包含了许多抗体,用于检测只在人类多能干细胞中表达的蛋白。这个试剂盒用于追踪人类胚胎干细胞或者诱导多能细胞(iPS)的多能潜力。这些标记的丢失意味着多能性的丢失或者培养基的分化。这个试剂盒成分经过了预先优化,可以同时在免疫荧光分析中使用。基于每次检测100ul工作体积,试剂足够用于50次检测。

特异性/敏感性

StemLight™ 多能性抗体试剂盒中的每个抗体检测它们对应的人类多潜能性标记物蛋白的内源水平。

来源/纯化

Nanog抗体通过使用针对人类nanog氨基端的氨基酸序列的合成肽免疫动物获得。抗体通过Protein A和肽亲和层析纯化。Oct-4A抗体通过使用针对人类Oct-4A的氨基端特异的重组蛋白免疫动物而得到。Sox2抗体通过使用针对人类Sox2氨基端的氨基酸序列的合成肽免疫动物获得。SSEA4、TRA-1-81和TRA-1-60(S)抗体通过使用人类胚胎癌2102Ep cl.2A6细胞免疫动物得到。

背景

多能性是细胞分化成三个原胚层细胞类型——内胚层、中胚层和外胚层的能力。它是胚胎干细胞、胚胎癌和诱导性多能细胞的共同特征。Oct-4,Sox2和Nanog在多能性细胞中高表达,是关键的转录调节因子(1)。他们共同形成一个转录网络,从而维持细胞的多能状态(2,3)。Oct-4和Sox2以及Klf4和c-Myc的过表达能诱导鼠和人体细胞的多能性,这突出了他们作为转录网络的关键调节因子在再生和多能性的重要作用(4,5)。现在已经证明,Oct-4、 Sox2、Nanog和Lin28可以诱导人类体细胞的多能性(6)。一旦多能性培养基分化后,Oct-4、Nanog和Sox2的表达就会下调。SSEA4、TRA-1-81和TRA-1-60抗体能够识别所有多能性细胞表面表达的抗原。SSEA4识别糖脂类碳水化合物的表位(7)。TRA-1-60(S)和TRA-1-81抗体识别相同蛋白质变种的不同蛋白多糖表位(8)。这些表位分别是神经氨酸苷酶敏感和耐受的。随着多能性细胞分化以及多能性潜能的丧失,SSEA4, TRA-1-81和TRA-1-60抗体与它们各自的细胞表面标记物的反应性也丢失了(9)。

Application References

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