Cell Signaling Technology

细胞因子&生长因子———质量

细胞因子的质量对您的研究意味着什么?

为了确保能够得到最高性能的细胞因子,我们遵循严格的质量控制标准:

  • 大多数产品都没有标签或者多余的氨基酸,并且许多产品都使用哺乳动物表达系统生产,从而得到天然构象和翻译后修饰。

  • 每个批次都使用相关的和标准的基于细胞的试验来确定ED50或者最大效应的50%。

  • 大多数细胞因子正如SDS-PAGE所展示的一样,纯度高达98%以上。

  • 不同批次经过测试来保证生物活性和纯度的一致性。

  • 内毒素水平由LAL试验进行测试,且低于0.01ng/µg细胞因子。

  • 还原性的蛋白通过跑SDS-PAGE胶来检测纯度,而非还原性的蛋白通过跑胶来确定半胱氨酸连接的二聚体的存在。

  • 产品的生物活性和纯度在每个产品网页和说明书上都有列示。

Datasheet image of product #8902, Human Tumor Necrosis Factor-alpha (hTNF-alpha)

纯度

Purity of recombinant hVEGF-121 #8908 with Coomassie Blue.

重组Human Vascular Endothelial Growth Factor-121 (hVEGF121) #8908的纯度通过6µg还原型(+)和非还原型(-)的重组hVEGF121 跑SDS-PAGE胶,考马斯亮蓝染色过夜后进行测定。SDS-PAGE中的两条带是由于糖基化引起的。非还原型的半胱氨酸连接的同源二聚体蛋白迁移到30-36kDa的位置。

生物活性

Proliferation of HUVEC treated with hVEGF-121 #8908.

用浓度增高的Human Vascular Endothelial Growth Factor-121 (hVEGF121) #8908 处理HUVEC细胞,接着检测其增殖状况。用hVEGF121 处理72小时之后,细胞与四唑盐孵育,然后测定OD450–OD650 。

免疫印迹

Western blot analysis of hVEGF-121 #8908.

未经处理的HUVEC裂解物和用Human Vascular Endothelial Growth Factor-121 (hVEGF121) #8908 处理15分钟后得到的裂解物,利用抗体fPhospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (3D7) Rabbit mAb #9215 (上) 和 p38 MAPK Antibody #9212 (下)进行免疫印迹分析。

人类肿瘤坏死因子-α (hTNF-α)

 

 

Serum-straved cells treated with hTNF-alpha #8902.

HeLa细胞经过血清饥饿处理,并用升高剂量的Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 处理20分钟。利用抗体IκBα (L35A5) Mouse mAb (Amino-terminal Antigen) #4814和 Phospho-NF-κB p65 (Ser536) (93H1) Rabbit mAb #3033 评估NF-κB活性。随着hTNF-α浓度的升高,总IκBα的量下降(3倍),而磷酸化NF-κB (Ser536)蛋白的量升高(5倍),这与TNF-α诱导IκBα的降解并激活NF-κB的事实相符合。每个抗体的信号通过Acumen®Explorer and images分析,而图像通过Cellomics ArrayScan® VTI获得。 

插图: 未处理的和用100ng/ml TNF-α处理20分钟分别得到的IκBα信号。

Purity of recombinant hTNF-alpha #8902 with Coomassie Blue.

重组Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 的纯度通过6µg还原型(+)和非还原型(-)的重组hTNF-α 跑SDS-PAGE胶,考马斯亮蓝染色过夜后进行测定。

Viability of L-929 cells treated with hTNF-alpha #8902.

在2ng/ml放线菌素D存在的情况下,L-929细胞用浓度依次升高的Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 处理后检测其生存率。细胞在处理结束后用结晶紫染色,并测定OD595 的读数。

 

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