Cell Signaling Technology

细胞因子&生长因子——常问的问题

Cell Signaling Technology (CST)公司的产品科学家优先考虑为客户提供卓越的服务和支持。我们自己生产细胞因子并进行生物测试,正如生产和测试我们的抗体一样。开发和测试这些试剂的科学家同时为客户提供技术支持。您可以直接联系这些科学家,他们会亲自为您提供技术帮助。

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适用的种属:人细胞因子适用于老鼠吗?

有些可以,然而大部分细胞因子在另一种属的细胞中会出现更高ED50或者没有ED50值。CST公司生产人和老鼠的重组蛋白。

在我使用蛋白时是否应该使用载体蛋白?

CST公司的细胞因子和生长因子是冻干的,以两种方式提供,一种是每1 µg细胞因子伴随20µg BSA(有载体蛋白),另一种是不含有添加的蛋白(无载体蛋白)。牛血清白蛋白(BSA)载体蛋白将吸附到表面的量减至最少,并使重构恢复的量最大化。含有载体蛋白的细胞因子通常用于组织培养应用。而不含有载体蛋白的细胞因子通常用于动物研究或者其他受BSA影响的步骤。

不同的细胞因子需要不同的重构缓冲液吗?

由于蛋白质之间的差异,我们测试并推荐特定的重构缓冲液。如果不使用指定的缓冲液,蛋白有可能不能完全溶解。

应该怎样配制PH3.020 mM的柠檬酸?

为了配制PH3.0,20 mM的柠檬酸缓冲液,先将适量的柠檬酸溶解在去离子水中,用NaOH将PH调至3.0,然后用0.2 µM过滤器进行无菌过滤。例如,要配制100ml的柠檬酸缓冲液,先将0.384g无水柠檬酸溶解在90ml去离子水中,然后滴几滴5M NaOH调节PH值,当PH达到3.0,用去离子水定容至总体积100ml。

为什么有些产品是液态的?

作为我们产品保证的一部分,所有的瓶装批次在用于销售分装之前都经过了生物测试。这保证了所有的瓶装蛋白质具有最好的生物活性和充足的量。一些细胞因子冻干后会失去生物活性。例如Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8901Human Latent TGF-ß1 #5154Mouse FGF basic #5414 就以溶液的形式出售。

什么是ED50,它与单位有什么联系?

ED50是指引起50%最大生物反应所需要的细胞因子或者生长因子的浓度。细胞因子的ED50通常指的是1单位。

为什么ED50都是一个范围?

许多基于细胞的实验都会出现不同测试之间的变动,这与蛋白本身的生物活性无关。ED50的范围是来自于一个批次的许多独立的测试。这个范围决定了将来的批次中的生物活性强弱。新的批次通常与旧的批次一起检测,从而保证测试之间变化的一致性。

什么是特定活性?怎样测定?

特定活性(用units/mg表示)是细胞因子或生长因子纯度和适宜的蛋白折叠的功能。为了测定特定活性,细胞因子处理后的读数在标准的生物实验中测量。ED50(用ng/ml表示),是指引起50%最大生物反应所需的细胞因子或生长因子的浓度,它在试验中可以测定。

下面的公式可以用来将以ng/ml为单位的ED50转换成以units/mg为单位的特定活性:

特定活性(units/mg)=10E6 / ED50(ng/ml)

国际单位指的是什么?它们和我们的产品有何关联?

特定蛋白质的生物活性的检测会由于实验室生物试验系统和细胞培养条件的不同而发生变化。为了标准化许多细胞因子和生长因子的检测,世界卫生组织(WHO)和英国生物学标准与控制研究院(NIBSC)生产了几批确定生物活性的蛋白,从而可以测试不同细胞因子样品的活性。这个尝试的目的是为测试和生产生物治疗用品提供国际化的“金标准”。

为了计算一个细胞因子的IU,细胞因子必须同时用NIBSC标准检测。

CST公司提供的细胞因子和生长因子是以重量出售的,而不是IU。我们现在还没有用NIBSC标准检测我们的细胞因子。

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