Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
59999S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人
使用与人 Nur77 中 Leu535 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Nur77 (也称 TR3 和 NGFI-B)是一种即早反应基因,也是类固醇/甲状腺/视黄醇受体超家族中的一名孤儿成员 (1-3)。Nur77 由一个氨基末端反式激活结构域、一个中央 DNA 结合域和一个羧基末端配体结合域组成。细胞凋亡、促有丝分裂和应激信号等多种刺激因素都会快速诱导 Nur77 表达 (1-6)。研究表明,许多功能与细胞增殖、分化和凋亡有关。T 细胞中的 Nur77 已得到广泛研究,结果表明 Nur77 与阴性选择过程和 TCR 介导的凋亡有关 (5,6)。Nur77 可结合特定 DNA 元件,调控靶标基因 (7)。作为一种潜在的细胞凋亡调控机制,Nur77 能诱导 FasL 和 TRAIL 等凋亡基因的表达 (8,9)。Nur77 可被许多激酶高度磷酸化,这可能会影响它的反式激活活性和亚细胞定位 (4,10,11)。Nur77 从胞核转位到线粒体能够调控与 Bcl-2 的结合,并控制细胞色素 c 的释放,从而引发凋亡 (12,13)。
探索与本品相关的通路。
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