Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
70657S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H M R Mk |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人, 小鼠, 大鼠, 猴
牛
使用与人 HSP90 蛋白 Asn300 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
HSP70 和 HSP90 均为在正常条件下呈结构性表达以维持蛋白稳态的分子伴侣,并会在环境应激下被诱导 (1)。HSP70 和 HSP90 能够与未折叠蛋白相互作用,以阻止不可逆聚合并以 ATP 和共伴侣分子依赖性方式催化其底物的重新折叠 (1)。HSP70 有许多底物,包括新合成蛋白和变性蛋白,而 HSP90 的底物则更为有限,其中多数是信号转导分子。HSP70 和 HSP90 通常在多伴侣分子系统中发挥协同作用,这至少需要以下共伴侣分子:HSP40、Hop 和 p23 (2,3)。共伴侣分子可调节伴侣分子的固有 ATP 酶活性或将伴侣分子募集到特定底物或亚细胞室 (1,4)。泛素连接酶 CHIP 作为辅因子结合 HSP70/HSP90 复合体时,未折叠底物会受到蛋白酶体降解的影响 (4)。HSP70/HSP90 的生物功能不仅仅只有伴侣分子活性。它们对于核激素和其他信号转导分子的成熟和失活非常重要 (1,3),还在囊泡形成和蛋白转运中发挥作用 (2)。
探索与本品相关的通路。
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