Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
96139S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H M R |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人, 小鼠, 大鼠
使用与人 H2AZ 蛋白乙酰化 Lys4 和 Lys7 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
染色质结构的调节在真核细胞的转录调节中起着关键作用。核小体由四个核心组蛋白(H2A、H2B、H3 和 H4)组成,它是染色质的主要成分。除了使用大量调节染色质结构的翻译后组蛋白修饰外,细胞还能用组蛋白变体交换典型组蛋白,从而直接或间接地调控染色质结构 (1)。组蛋白 H2A 有五种主要变体:典型 H2A(最丰富)、H2A.X、MacroH2A、H2ABbd 和 H2A.Z (2)。组蛋白 H2A.Z 是物种中最保守的一种变体,可同时作为转录的正负调节分子,并且对染色质稳定性非常重要 (2)。多种同源性蛋白复合体可催化核小体中 H2A.Z 与 H2A 之间的 ATP 依赖性互换,这些复合体包括 SWR-C(酿酒酵母)、TIP60(果蝇)和 SRCAP(哺乳动物)(3,4,5)。这种组蛋白 H2A 变体的互换会改变核小体核心中组蛋白之间的相互作用,修改核小体表面的酸性补丁,从而改变核小体稳定性及与非组蛋白(如 HP1α)的结合 (6,7)。
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