Cell Signaling Technology

Product Pathways - PI3K / Akt Signaling

Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb #4060

Akt S473   Akt1   Akt2   Akt3   p-Akt   pAkt   phospho Akt   phospho-Akt   PKB   Protein kinase B   RAC-PK-alpha   s473   sc-7985  

No. Size Price
4060L 300 µl ( 60 western blots ) ¥9,458.00 现货查询 购买询价
4060S 100 µl ( 20 western blots ) ¥3,990.00 现货查询 购买询价
4060T 20 µl ( 2 western blots ) ¥1,600.00 现货查询 购买询价
4060 carrier free & custom formulation / quantityemail request
Applications Dilution Species-Reactivity Sensitivity MW (kDa) Isotype
W 1:2000 Human,Mouse,Rat,Hamster,Monkey,D. melanogaster,Zebrafish,Bovine, Endogenous 60 Rabbit IgG
IP 1:50
IHC-P 1:50
F 1:100
IF-IC 1:200
IHC-F 1:50

Species cross-reactivity is determined by western blot.

Applications Key: W=Western Blotting, IP=Immunoprecipitation, IHC-P=Immunohistochemistry (Paraffin), F=Flow Cytometry, IF-IC=Immunofluorescence (Immunocytochemistry), IHC-F=Immunohistochemistry (Frozen),

Homology

Species predicted to react based on 100% sequence homology: Chicken, Xenopus, Dog, Pig,

Specificity / Sensitivity

Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 能够检测内源性的丝氨酸(473位点)磷酸化的AKT蛋白。

Source / Purification

该单克隆抗体是采用合成的与人源AKT蛋白丝氨酸(473位)周围序列相对应的磷酸肽段免疫动物而生产的。

Western Blotting

Western Blotting

western blot方法检测细胞提取物:未处理和LY294002/wortmannin处理的PC-3细胞,血清饥饿和PDGF处理的NIH/3T3 细胞。使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(上图) 和 Akt (pan) (C67E7)Rabbit mAb #4691 (下图).

IF-IC

IF-IC

激光共聚焦荧光法检测C2C12 细胞, 左图为LY294002处理的,右图为胰岛素处理的 ,检测抗体为Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb,呈绿色。蓝色伪彩为DNA荧光染料(产品信息为 DRAQ5®#4084 )。

IHC-P (paraffin)

IHC-P (paraffin)

免疫组织化学方法检测石蜡包埋的U-87MG 异种移植物,左图为未处理的,右图为lambda磷酸酶处理的,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。

IHC-P (paraffin)

IHC-P (paraffin)

免疫组织化学方法检测石蜡包埋的异种移植的MDA-MB-468 ,使用抗体为Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb (左图) 和 PTEN (138G6) Rabbit mAb #9559 (右图)。显示磷酸化AKT在PTEN缺陷的MDA-MB-468细胞中阳性染色。

IHC-P (paraffin)

IHC-P (paraffin)

免疫组织化学方法检测石蜡包埋的人肺癌组织,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。

IHC-P (paraffin)

IHC-P (paraffin)

免疫组织化方法验证Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb抗体,使用的切片为SignalSlide® Phospho-Akt (Ser473) IHC Control#8101(石蜡包埋的LNCaP细胞),左图为未处理的LNCaP细胞,右图为LY294002处理的LNCaP细胞。

IHC-P (paraffin)

IHC-P (paraffin)

免疫组织化学方法检测石蜡包埋的人乳腺癌组织,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。

IHC-P (paraffin)

IHC-P (paraffin)

免疫组织化学方法检测石蜡包埋的PTEN杂合突变小鼠子宫内膜组织,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。(组织切片由Dr. Sabina Signoretti, Brigham and Women''s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA.馈赠)

Flow Cytometry

Flow Cytometry

流式细胞方法检测未处理的和LY294002,wortmannin 和 U0126 处理的Jurkat细胞,绿色为未处理组,蓝色为处理组,红色为非特异结合的阴性对照。使用抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。

IHC-P (paraffin)

IHC-P (paraffin)

免疫组织化学方法检测石蜡包埋的人乳腺癌组织,左图使用的是SignalStain® Antibody Diluent (抗体稀释液),右图使用的是TBST/5% normal goat serum (正常山羊血清),使用的抗体是Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb #4060。

IHC-F (frozen)

IHC-F (frozen)

免疫组织化学方法检测冰冻SKOV3异种移植物,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。

Background

Akt,又被称为PKB 或 Rac,在细胞的生长和凋亡中起到关键作用(1-3)。被胰岛素(insulin)或各种生长及存活因子激活后,这个激酶在包括PI3K在内的对wortmannin敏感的通路中起作用(2,3)。磷脂结合可以调控Akt的激活,其苏氨酸308位点被PDK1环磷酸化(4),并且在该蛋白碳链末端丝氨酸(473)位点磷酸化。以前研究认为PDK2在丝氨酸473位点磷酸化Akt,实际为哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR,mammalian target of rapamycin),其存在于包含rictor 和Sin1 的雷帕霉素非敏感复合体中。Akt促进细胞的生长通过抑制细胞的凋亡 ,例如Akt可以抑制下游靶蛋白Bad (7), forkhead 转录因子 (8), c-Raf (9), and caspase-9。PTEN 磷酸酶是抑制PI3 激酶/Akt信号通路的主要蛋白(10)。 LY294002是特异的 PI3 激酶的抑制剂(11)。Akt 的另外一个主要功能是通过磷酸化和抑制GSK-3α 和 β调控糖原的合成(12,13)。Akt 也可以调控insulin诱导的葡萄糖转运 (12)。除此之外,Akt还可以调控细胞周期,通过抑制GSK-3β,从而调控其下游的cyclin D1 的磷酸化和降解 (14),或者负向调控cyclin依赖的激酶抑制因子 p27 Kip (15) and p21 Waf1/CIP1 (16)。Akt 也可以通过直接磷酸化mTOR,以包含raptor的雷帕霉素敏感复合体调控细胞的生长(17)。更重要的是,Akt磷酸化和抑制TSC2, 而TSC2在 mTOR-raptor 复合体中是mTOR的抑制因子(18,19)。

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Application References

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Companion Products


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DRAQ5 is a registered trademark of Biostatus Limited.

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.

XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.

SignalStain is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.

Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.

Cell Signaling Technology® is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.

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