Cell Signaling Technology

Webinar预告:斑马鱼胚胎大组织——
RNAscope®技术高分辨检测转录本

北京时间:2014911日,星期四,晚1000

太平洋标准时间:2014911日,星期四,上午07:00

摘要:大组织原位杂交(Whole-mount in situ hybridization ,WISH)是研究完整胚胎和组织中RNA分子的时空表达模式的基础工具。以往检测胚胎中mRNAs的方法依赖于产生产物的酶活性和化学反应,而不是固定于检测RNA,因此降低了相关技术的空间分辨率。此外,目前的WISH 技术非常消耗时间,而且经常与报告的蛋白分子表达方法不兼容。

即将讲解的操作步骤基于RNAscope®技术,能够快速呈现斑马鱼胚胎中多个转录本的表达。 

本讲座将为大家讲解:

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主讲人:Azadeh Paksa & Theresa Gross-Thebing from Prof. Dr. Erez Raz's lab,Institute of Cell Biology - Center for Molecular Biology of Inflammation
Münster, Germany

简介:Theresa Gross-Thebing, Azadeh Paksa和Erez Raz 建立了一种创新的在大组织斑马鱼胚胎样本上运用RNAscope®技术的方法 。这个方法以及更加细节的操作步骤请见发表在《BMC Biology》上的文章:

Simultaneous high-resolution detection of multiple transcripts combined with localization of proteins in whole-mount embryos

BMC Biology 2014, 12:55 doi:10.1186/s12915-014-0055-7

Johannes Hartwig, Katsiaryna Tarbashevich, Jochen Seggewiß, Martin Stehling, Jan Bandemer, Cecilia Grimaldi, Azadeh Paksa, Theresa Groß-Thebing, Dana Meyen 和 Erez Raz 运用这种创新的方法,在《PNAS》上发表了他们的工作:

Temporal control over the initiation of cell motility by a regulator of G-protein signaling

PNAS 2014 111: 11389-11394.  doi: 10.1073/pnas.1400043111

尽管RNAScope®技术能够用于任何基因、任何种属的RNA原位杂交,但是合适的样品制备非常重要。Theresa Gross-Thebing 和Azadeh Paksa 非常愿意回答各种针对大组织胚胎样本制备的问题。如果您有这方面的问题,可以邮件到RNAscope4zebrafish@acdbio.com,他们将在1周内回答。

如何开始RNAScope®实验?

1. 订购斑马鱼特异的管家基因用作阳性对照探针。Erez Raz Lab 使用的是斑马鱼myoD 基因(第2通道),CAT # 402461-C2  Dr-myod1-C2.

2. 订购RNAscope® 阴性对照探针CAT # 310043 Negative Control Probe-DapB

3. 订购RNAscope® 目标探针。ACD 公司目前提供33个斑马鱼特异的探针(www.acdbio.com/probesearch)。定制目标探针可在2周内设计和生产。

4. 订购一个RNAscope® Assay Reagent Kit。Erez Raz Lab 使用的是CAT # 320850 RNAscope® Multiplex Fluorescent Reagent Kit, 包含以下3个独立的组分:

观察图像需要一个多谱的显微镜成像系统。你可以使用这个Assay Kit同时检测4个基因。此外,ACD提供3种显色分析试剂盒;当然,这3种显色分析试剂盒目前还不能用于大组织斑马鱼胚胎样本。

更多关于斑马鱼RNAscope®ISH的信息,请访问 http://www.acdbio.com/zebrafish页面。

 

中国区RNAScope®技术支持:

赛信通(上海)生物试剂有限公司暨美国CST公司中国公司

电话:021-5835 6288

热线:4006-GreatQ/473287

邮箱:info@cst-c.com.cn

 

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