为了确保及时地获取解决方案,请在联系我们时准备好以下信息。

常见问题

  1. 公司/大学名称。
  2. 显微镜/成像系统类型。
  3. 激发源(特定激光、水银灯等)。

抗体信息

  1. 货号。
  2. 批号(印在试管标签上)。
  3. 使用的稀释度。
  4. 二抗(如果没有使用偶联抗体)。
  5. 二抗供应商/货号。
  6. 荧光物质(如FITC)。
  7. 二抗稀释度。
  8. 您是否将此二抗成功用于免疫荧光法?

样本

  1. 类型:
    1. ICC/细胞系
    2. 石蜡切片
    3. 固定的冷冻切片
    4. 新鲜的冷冻切片
  2. 样本来源(细胞系或组织、物种)。
  3. 固定前如何处理细胞/组织(配体、抑制剂等)?
  4. 固定方法(浸入液体、灌注)。
  5. 描述固定和样本制备方案,包括固定剂类型、孵育时间及浓度。
  6. 如果使用细胞系,细胞处理后与固定前之间相差多长时间?
  7. 切片/固定和染色后过去多长时间?
  8. 如何储存未染色的切片?

染色实验步骤

  1. 抗原修复。
  2. 封闭方法。
  3. 稀释缓冲液(包括去垢剂)。
  4. 一抗孵育时间/温度。
  5. 二抗孵育时间/温度。
  6. 请列出相同切片上使用的其他一抗。
  7. 您是否确定靶标存在于这些细胞/组织?
  8. 如果您使用磷酸抗体,那么该实验步骤是否会影响该靶标的磷酸化(经发表的参考文献或其他应用确认)?
  9. 阳性对照(处理的细胞、其他组织等)。
  10. 阴性对照:
    1. 无一抗
    2. 同型对照
    3. 阴性细胞/组织
  11. Ig 同型对照抗体浓度(如果适用)。
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